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帕博利珠单抗原液生产车间工艺设计

摘要

帕博利珠单抗是美国默沙东公司研发用于治疗肿瘤的PD-1单抗，该单抗通过靶向阻断PD-1/PD-L1通路，用人体的自身免疫系统对抗多种肿瘤。2014年被美国食品药品监督管理局批注上市，用于治疗对其他治疗方法不再反应的晚期或不可切除的黑色素瘤。2018年在我国以同样的适应性获得上市，PD-1单抗药物的需求量剧增。由于帕博利珠单抗的需求量较大，价格昂贵的问题，所以设计出能量产，品质好的生产工艺。本设计详细介绍生产帕博利珠单抗原液生产车间工艺设计，本设计通过借鉴其他PD-1单抗生产车间先进技术和经验，并结合生产单克隆抗体的新型的发酵技术和单抗纯化技术，和充分考虑生产帕博利珠单抗的需要的种子类型、扩大培养方法、发酵罐的选型、生产车间布局，从而设计出实用性，创新性的帕博利珠单抗原液车间工艺。

关键词：帕博利珠单抗、工艺设计，车间布局

1前言

1.1关于帕博利珠单抗的介绍

帕博利珠单抗是一种PD-1单抗，是人源免疫球蛋白lgG4抗体，而PD-1单抗是指程序性细胞死亡蛋白-1抑制剂，属于单克隆抗体类免疫检查点抑制剂。其中，程序性死亡蛋白-1，是I型表面跨膜受体蛋白，属于CD28家族成员，一共由268个氨基酸组成。在1992到1999年间本庶佑团队先在T细胞上发现PD-1蛋白，随后发现除去PD-1基因的小鼠，表现出较为强大的免疫功能，甚至有自身免疫疾病的症状［1、2］。而PD-1抗体能特异性地与肿瘤细胞上的

PD-1结合抑制其表达，从而受到抑制的免疫T细胞恢复对肿瘤细胞识别功能，最终通过自身免疫系统达到抗癌的作用。该种通过恢复自身免疫系统抗癌方法利于针对晚期和无法切除肿瘤的治疗，且从众多治疗案例统计来说肿瘤免疫治疗法能明显延长一些恶性肿瘤病人的生存期，且比传统疗法更为安全、耐性更好。由此，帕博利珠单抗作为其中的一种PD-1单抗在2014年在美国批准上市后，市场对于PD-1单抗药物需求增多。现在获批上市不同类型的PD-1单抗如纳武利尤单抗、西米普利单抗、卡瑞利珠单抗等，其结构各不相同，其可变区差异导致其余PD-1受体的结合

位点，亲和力，受体占有率以及免疫原性等不同，导致治疗不同的肿瘤有着不同的效果［3］。帕博利珠单抗与

PD-1受体相互结合主要依赖PD-1的可变区CD环，通过该种使得帕博利珠单抗与T细胞结合紧密，阻碍了PD-L1配体结合面，当该结合面积越大是，能够阻挡PD-L1结合的可能性就越大，即阻断PD-1/PD-L1通道，从而引起自身的免疫对抗肿瘤细胞气

如今，患肿瘤人数增多，对于治疗肿瘤药物的需求就不断增加，帕博利珠单抗作为其中一种PD-1抑制剂无疑是需求量较大的，由于帕博利珠单抗并不仅用于治疗黑色素瘤，还能用于肺癌等多种肿瘤疾病，利用率较高。同时，该单抗现在由拥有该专利的默沙东公司生产，价格较为昂贵。有需求设计出生产较大批量的帕博利珠单抗原液的生产工艺。总的来说，帕博利珠单抗是也是一种单克隆抗体，基于现在发达的基因工程技术，容易获得种子，同时科技不断革新，发酵培养条件得到更好的控制，且通过借鉴有成熟的种子扩大培养技术，各种类型新建的单克隆抗体工厂和新型的单抗纯化技术，从而设计出新型的帕博利珠单抗原液车间工艺。

1.2帕博利珠单抗的国内外发展现状

帕博利珠单抗在80多个国家批准上市使用，用于11瘤种的17以上适应症。帕博利珠单抗用于多个适应症，且其治疗效果良好优于化疗，因此需求量较大，使得帕博利珠单抗药品可瑞达在2019年为全球畅销药物的第三位。现在主要仅有美国默沙东公司研发得到的私有专利，该公司在我国的杭州生产该单抗注射剂的工厂。与此同时，我国在近几年间投入大量资金用于研发应用于不同适应症的PD-1单抗，上海君实单抗特瑞普利单抗，信达生物制药的信迪利单抗，苏州胜迪亚生物医药的卡瑞利珠单抗的相继出现［5］，有效地应对不同的适应症，但由于PD-1单抗肿瘤免疫治疗会产生耐药性［6］，会产生肿瘤免疫治疗的效率问题，因此在应用PD-1单抗进行肿瘤治疗研发的道路上还需要更多的投入。帕博利珠单抗在治疗肿瘤上具有广谱性，能用于治疗多种类型肿瘤，所以总体来说，发展创新帕博利珠单抗生产工艺是有必要的。随着单克隆抗体生产工艺技术也不断发展。从PD-1单抗生产技术上看，其单抗的生产表达水平从原来每升0.5g以下上升至510g，且在反应器规模上，从单反应器体积的500L上升到1000

10000L，且反应设备的更新，如抛弃型反应器即一次性生物反应器的开发应用。相同的PD-1单抗开始在国内快速提升产能，国产恒瑞医药生产卡瑞利珠单抗原液产量19440L，而替雷利珠单抗