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趋化因子CXCL14在结直肠癌组织中的表达及其临床相关性

研究

林刻智;林峰;郑双;沈洁;沈贤;薛向阳

【摘要】目的:分析趋化因子CXCL14在结直肠癌组织中的表达,并探讨其表达的临

床意义.方法:采用实时荧光定量PCR和免疫组化对40例结直肠癌及癌旁正常组织

CXCL14的表达进行检测.Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型评估CXCL14

在结直肠癌组织中表达的临床意义.结果:CXCL14mRNA和蛋白水平在结直肠癌组

织中的表达较正常组织明显降低(P＜0.05).临床相关性分析表明,CXCL14表达的下

调与肿瘤淋巴结转移、发生部位以及临床病理分期有关(P＜0.05).Kaplan-Meier

生存分析显示,不同CXCL14蛋白表达水平的患者,生存时间具有显著差异(P＜0.01).

结论:CXCL14可能参与结直肠癌的发生、发展过程.

【期刊名称】《中国病理生理杂志》

【年(卷),期】2014(030)002

【总页数】5页(P355-358,373)

【关键词】趋化因子CXCL14;生存分析;结直肠肿瘤

【作者】林刻智;林峰;郑双;沈洁;沈贤;薛向阳

【作者单位】温州医科大学基础医学实验中心,浙江温州325035;台州市第一人民

医院普外科,浙江台州318020;台州市第一人民医院普外科,浙江台州318020;台州

市第一人民医院普外科,浙江台州318020;温州医科大学附属第一医院胃肠外科,浙

江温州325000;温州医科大学微生物与免疫学教研室,分子病毒与免疫研究所,浙江

温州325035

【正文语种】中文

【中图分类】R363

结直肠癌是胃肠道最常见的恶性肿瘤之一，每年全球约有40万病例死于该病

［1］。迄今，结直肠癌发生和发展的机制仍不清楚。肿瘤微环境已逐渐被认为是

癌症发生和发展的一个重要的参与者［2-4］，其中的趋化因子在肿瘤增殖、转移

等方面起着重要作用［3-4］。趋化因子CXCL14是CXC趋化因子家族的一员。

研究发现，CXCL14在不同类型肿瘤表达不一致，在肾癌、肺癌、头颈部鳞状细胞

癌、宫颈癌等组织中几乎没有表达或者表达很低［5-8］，而在部分前列腺癌和胰

腺癌中［9-10］却高水平表达。我们前期胃癌标本检测结果也发现CXCL14表达

在肿瘤组织明显降低［11］。迄今，CXCL14在结直肠癌中的表达及临床意义目

前仍不清楚。因此，本研究分析CXCL14在结直肠癌组织中蛋白和mRNA的表达

及临床意义。

1材料

Trizol试剂购自Invitrogen;ReverTraAce逆转录试剂盒和SYBRMasterMix购

自Toyobo;DNaseⅠ和DEPC水购自宝生物工程(大连)有限公司;CXCL14特异性

抗体I抗购自Abcan;辣根过氧化物酶标记羊抗兔II抗、羊血清封闭液和DAB显色

液购自北京中杉金桥生物公司;引物由上海英骏生物技术有限公司合成。

2方法

2.1组织标本采集及处理本研究的结直肠癌40例患者来自2008年12月至2009

年4月台州市第一人民医院内镜活检确诊并经外科治疗的病人。结直肠癌的组织

病理学诊断由医院病理科根据世界卫生组织的标准，术后证实。所有这些患者术前

未接受放疗或化疗，术后根据美国国立癌症综合网(NationalComprehensive

CancerNetwork，NCCN)结直肠癌指南接受严格的化疗。以上结直肠癌组织及相

应正常组织(取自距肿瘤边缘2cm处)的成对标本(经病理确诊)均被分为2部分:一

部分样本在手术切除后30min，采用液氮冷冻保存，以备RNA的提取;其余组织

由4%甲醛固定，石蜡包埋、切片，进行免疫组化检测。

2.2RNA的分离纯化总RNA的提取参照Trizol试剂说明书进行。为去除可能污染

的DNA，抽提的RNA经DNaseⅠ处理后，酚-氯仿抽提，纯化的RNA以DEPC

水溶解，用紫外分光光度计检测RNA浓度后，-80℃