一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶活力的方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN105505909A

(43)申请公布日2016.04.20

(21)申请号CN201511033116.6

(22)申请日2015.12.31

(71)申请人安徽丰原发酵技术工程研究有限公司

地址233030安徽省蚌埠市淮上区怀五路南侧

(72)发明人秦晴许鹏冯杰杨为华纪传侠娄雯

(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司

代理人王文君

(51)Int.CI

C12N9/90

C12P7/46

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异

构酶酶活力的方法

(57)摘要

本发明涉及酶化学领域，具体公开

一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶

活力的方法，具体为在马来酸顺反异构酶

参与的酶解反应体系中添加岩藻糖。本发

明通过实验优化了岩藻糖的添加浓度，使

最大程度的提高马来酸顺反异构酶的酶活

力。本发明所述方法简单易行，在马来酸

顺反异构酶反应过程中具有可以节约酶用

量，提高反应效率的优点。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.岩藻糖在提高马来酸顺反异构酶酶活力中的应用。

2.一种利用岩藻糖提高马来酸顺反异构酶酶活力的方法，其特征在于，

在马来酸顺反异构酶参与的酶解反应体系中添加岩藻糖。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述岩藻糖相对于

酶解反应体系的添加浓度为0.3～1.0mmol/L，优选0.5mmol/L。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酶解反应体系

中，马来酸顺反异构酶的浓度为20～200U，反应底物的浓度为

100～2500mmol/L；优选马来酸顺反异构酶的浓度为25～50U，反应底

物的浓度为100～1000mmol/L。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述反应底物为马

来酸或马来酸盐。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述岩藻糖为固体

或水溶液。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酶解反应条件

为20～50℃，pH3.5～9.0；优选37℃，pH8.4。

8.根据权利要求5～7任一项所述的方法，其特征在于，所述马来

酸顺反异构酶来源于假单胞菌属(Pseudomonas)、产碱杆菌属

(Alcaligenes)、沙雷氏菌属(Serratia)、变形杆菌属(Proteus)、节杆菌属

(Arthrobacter)或含有马来酸顺反异构酶基因或其突变体基因的工程

菌的培养物或分泌物。

9.一种以马来酸为原料生产富马酸的方法，其特征在于，包括如下步

骤：

1)将比活为50U/mg的马来酸顺反异构酶酶液，用缓冲液稀释至

pH8.4，加入pH8.4浓度为1mol/L的马来酸溶液中；

所述马来酸顺反异构酶酶液与马来酸溶液的体积比为9:1；

2)加入岩藻糖，使岩藻糖相对于整个反应体系的浓度为

0.3～1.0mmol/L；

3)35～40℃反应15～30min，用0.45μm有机滤膜过滤，收集滤液

进行处理，得到富马酸。

10.根据权利要求2～8任一项所述的方法，其特征在于，所述缓

冲液为pH8.4，50mmol/L的NaHPOsub4/sub-

KHsub2/subPOsub4/sub缓冲液。