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浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:49
实验时间:8月30日13:30-17:30请勿透露学校、教师和个人信息
大鼠心肌组织SOD活力的测定
【实验结果】
1.经BCA蛋白浓度测定试剂盒检测蛋白质浓度,在562nm波长下测得吸光度,得到蛋白质标准曲线(图1),
再根据标准曲线求出样品蛋白质含量(表1)。
图1蛋白质标准曲线
表1大鼠心肌组织蛋白质含量
组别蛋白质含量mg/mL
正常组5.867
模型组4.527
OJP1-1004.504
OTP1-3004.338
普萘洛尔组7.764
注:普萘洛尔组:阳性对照组;OPJ1-100:麦冬多糖100mg/kg组;OPJ1-300:麦冬多糖300mg/kg组
2.依据SOD活力计算公式:组织匀浆中的SOD活力(U/mg)=(对照管吸光度-测定管吸光度)/对照管
吸光度÷50%×(反应液总体积/取样量(mL))÷组织中蛋白含量(mgprot/mL)进行SOD活力计算
同时,经SPSS19.0软件分析,结果显示:与正常组相比,模型组大鼠心组织SOD活力下降,有显著性
差异(P0.01);与模型组相比,OJP1-100组、OJP1-300组、普萘洛尔组大鼠心组织SOD活力都升
高,且均有显著性差异(P0.01)(表2图2)。
浙江省第六届大学生生命科学学科竞赛实验记录序号:49
实验时间:8月30日13:30-17:30请勿透露学校、教师和个人信息
表2OJP1对心肌缺血大鼠SOD活力的影响(×±s,n=6)
组别SOD活力
正常组50.941±2.089
##
模型组29.944±2.793
OPJ1-100组43.170±2.091**
OPJ1-300组42.297±1.618**
普萘洛尔组48.859±3.065**
注:普萘洛尔组:阳性对照组;OPJ1-100:麦冬多糖100mg/kg组;OPJ1-300:麦冬多糖300mg/kg组。
##:与正常组比较P0.01);**:与模型组比较P0.01。
图2OJP1对心肌缺血大鼠SOD活力的影响
【实验讨论】
本实验所用试剂盒测定SOD方法为黄嘌呤氧化酶法,据文献报道,在黄嘌呤氧化酶法中影响超氧化物
歧化酶(SOD)活性测定的干扰因素较多,组织匀浆中含有较多干扰物质,其中蛋白质的干扰最大,可能与
蛋白质本身带有的一些化学基团更容易与超氧阴离子自由基反应有关,需重复实验来验证实验结果。
考虑到上次实验所用的组织匀浆曾在-20℃冰箱放置了3天,且测SOD活力时未将组织上清放置冰上,
所得结果不理想,因此在本次重复实验中,
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