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－Ｓｅｊｏｔｅｍｂｅ２００２，ｖｏｌ１９，Ｎｏ．５
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大鼠原位移植肝脏中细胞凋亡与转化生长因子一８１ｍＲＮＡ
表达的实验研究
田伟军梁小宇朱理玮王鹏志
本实验旨在探讨大鼠原位肝移植免表１术后各组大鼠移植物中细咆凋亡变化（．ｙ－±ｓ）
疫特惠的机制，研究肝脏移植移植物中
肝实质细咆和浸润细咆凋亡及肝脏移植
移植物中转化生长因子一ｐ１（ＴＧＦ—ｐ１）
ｍＲＮＡ的表达变化。
材料与方法
一
、
１．实验动物分组：肝移植模型用改表２大鼠移植肝脏中实质与间质细咆凋亡指数变化（Ｘ－±ｓ）
良Ｋａｍａｄａ【Ｊ方法进行。Ａ组ＳＤ大鼠原
位肝移植假手术对照组，（＝３０）；Ｂ组
Ｗｉｓｔａｒ￣ＳＤ原位肝移植组。（＝３０）。
肝脏移植大鼠分别于术后１、３、５、７、１４ｄ
各引颈处死６只，获取移植物，迅速用液
氮降温，一８０℃低温冰箱保存备用。表３各组大鼠移植物中ＴＧＦ一岛ｍＲＮＡ转录水平的半定量检测结果（±ｓ）
２．细咆凋亡的动态检测：用ＴＵＮＥＬ
法标记过氧化物酶显色检测细咆凋亡。
每张切片随机选取１０个高倍视野，读取
细咆凋亡数，计算平均值。移植脏器实
质及间质细咆凋亡指数计算方法：每张
切片在４００倍光镜下随机计数１０００个实Ｐ＜０．０５）。浸润淋巴细胞，实质细胞凋亡较少，提示
质或间质细咆，记录凋亡细咆数，可记为２．各组移植物中实质与间质细咆凋肝脏通过浸润细咆凋亡得到保护。
实质或间质细咆凋亡指数。亡指数变化（表２）：在术后３、５、７、１４ｄ相本实验结果显示。肝移植组在术后
３．分子生物学实验：用逆转录聚合同时间内，移植肝脏内实质细咆凋亡指第３天起ＴＧＦ一８１ｍＲＮＡ水平升高，与对
酶链式反应（ＲＴ，ＰＣＲ）检测大鼠移植肝数明显少于间质细咆凋亡指数（Ｐ＜照组差异有显著性（Ｐ＜０．０５），这说明
脏组织中ＴＧＦ．ｐ１ｍＲＮＡ含量。ＴＧＦｐ１０．０５．表２）。ＴＧＦ—Ｇ１在Ｗｉｓｔａｒ—ｓＤ原位肝脏移植模
引物来源见文献［２］。以ｐ一机动蛋白（ｐ—３．各组大鼠移植物中ＴＧＦ一８１编码
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