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AKT-GSK-3β信号转导通路调控吉西他滨对肝癌细胞化疗敏感

性的研究

摘要】目的：研究AKT-GSK-3β信号转导通路调控吉西他滨对肝癌细胞化疗敏感

性。方法：培养肝癌细胞，检测吉西他滨作用后肝癌细胞凋亡、吉西他滨作用下

肝癌细胞AKT/GSK-3β通路激活、阻断通路后肝癌细胞凋亡情况。结果：吉西他

滨化疗后SMMC-7721、HepG2的Anti-Bcl-2、Anti-BAX表达均显著高于化疗前（P

＜0.05）。吉西他滨化疗后SMMC-7721、HepG2的Anti-p-AKT、Anti-p-GSK-3βser9

表达均显著高于化疗前（P＜0.05）。化疗前、化疗后、阻断后SMMC-7721、

HepG2的Anti-Bcl-2表达均逐渐降低（P＜0.05），Anti-BAX表达均逐渐升高（P＜

0.05）。结论：AKT-GSK-3β信号转导通路调控吉西他滨对肝癌细胞化疗敏感性高，

值得进一步深入研究。

【关键词】AKT-GSK-3β信号转导通路；吉西他滨；肝癌细胞；化疗敏感性

【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】2095-1752

（2020）05-0153-02

本研究对AKT-GSK-3β信号转导通路调控吉西他滨对肝癌细胞化疗敏感性进行了研究。

1.资料与方法

1.1研究对象

采用SMMC-7721传代肝癌细胞、HepG2传代肝癌细胞。

1.2主要试剂与仪器

高糖DMEM、胎牛血清、SDS凝胶制备试剂盒、0.25%胰蛋白酶、蛋白上样缓冲液、

脱脂奶粉、0.45nmPVDF膜、ECL发光显影液，Bio-radImageLab凝胶成像系统、电泳仪、细

胞培养箱、离心机、生物安全柜。

1.3方法

1.3.1肝癌细胞培养将完全培养液制作出来，其包含青链霉素+10%胎牛血清+高糖

DMEM，在37℃5%CO2培养箱中对HepG2细胞、SMMC-7721细胞进行培养，将对数生长期

细胞取出来进行实验[1]。

1.3.2吉西他滨作用后肝癌细胞凋亡检测将对数生长期的HepG2细胞、SMMC-7721细

胞取出来，分别将细胞悬液制作出来，在六孔板中加入2.5×105个/孔数量。在细胞融合率在

50%-70%之间时，用20μg/ml吉西他滨分别进行18h作用。Westernblot对肝癌细胞中BAX、

Bcl-2蛋白表达情况进行检测。

1.3.3吉西他滨作用下肝癌细胞AKT/GSK-3β通路激活检测

用吉西他滨在肝癌细胞作用，Westernblot对总AKT、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达情况进

行检测。

1.3.4阻断通路后肝癌细胞凋亡情况吉西他滨作用前1h用PI3K/AKT特异抑制剂

LY294002将该通路阻断，然后用吉西他滨在肝癌细胞作用，再次进行Westrenblot对肝癌细

胞中BAX、Bcl-2蛋白表达情况进行检测，以对化疗效果受到AKT/GSK-3β信号通路的影响进

行观察。

1.4统计学分析

数据采用SPSS21.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检

验，计量资料采用（x-±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1吉西他滨化疗后肝癌细胞凋亡相关蛋白表达情况，见表1。

表1吉西他滨化疗后肝癌细胞凋亡相关蛋白表达情况分析（x-±s）

3.讨论

本研究结果表明，吉西他滨化疗后SMMC-7721、HepG2的Anti-Bcl-2、Anti-GAPDH显著

低于化疗前；而Anti-BAX表达均显著高于化疗前（P＜0.05）见表1。吉西他滨化疗后SMMC-

7721、HepG2的Anti-p-AKT、Anti-p-GSK-3βser9表达均显著高于化疗前（P＜0.05）。化疗前、

化疗后、阻断后SMMC-7721、HepG2的Anti-Bcl-2表达均逐渐降低（P＜0.05），Anti-BAX表

达均逐渐升高（P＜0.05），见表2，和相关医学研究结果一致[2]。

综上所述，AKT-GSK-3β信号转导通路调控吉西他滨对肝癌细胞化疗敏感性高，值得进一

步深入研究。

【参考文献】