版微生物限度检查法增修订内容课件.ppt

05版微生物限度检查法增修订内容金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)取亚碲酸钠肉汤（或营养肉汤）培养基培养18～24小时，必要时可延至48小时的培养物，划线接种于卵黄氯化钠琼脂培养基或甘露醇氯化钠琼脂培养基的平板上，培养24～72小时。若平板上无菌落生长或生长的菌落不同于表5所列特征，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。若平板上生长的菌落与表5所列的菌落特征相符或疑似，应挑选2～3个菌落，分别接种于营养琼脂培养基斜面上，培养18～24小时。取营养琼脂培养基的培养物进行革兰染色，并接种于营养肉汤培养基中，培养18～24小时，作血浆凝固酶试验。05版微生物限度检查法增修订内容增订大肠菌群和梭菌检查法。大肠菌群（Coliform或Coliformbacteria）作为水质粪便污染的指示菌已有80多年的历史。大肠菌群是指在37℃生长时能发酵乳糖，24h内产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌。符合上述定义的细菌除大肠埃希菌属外，还包括肠杆菌科的肠杆菌属、枸橼酸菌属、克雷伯菌属。大肠菌群基本上包括了正常人畜肠道内的全部需氧的革兰阴性杆菌，较大肠埃希菌更具代表性，且存活时间较长。故检出大肠埃希菌，一般认为药品受粪便的近期污染；而检出大肠菌群，则表示药品受粪便的近期或远期污染。以大肠菌群作为口服药品微生物限度标准的控制菌，具有广泛的卫生学意义，更能反映药品的卫生质量。05版微生物限度检查法增修订内容?大肠埃希菌属枸橼酸菌属克雷伯菌属肠杆菌属ⅠⅡⅢⅣⅠⅡⅠⅡⅢⅣⅠⅡI+-+--+-+---+M++++++------V-P------++++++C----++++-+++H2S------------乳糖（44℃）+--+-----+--大肠菌群分类05版微生物限度检查法增修订内容国际上用大肠菌群作为卫生指示菌，有三种不同体系：1.肠杆菌中能迅速发酵乳糖产气的4类细菌，只有大肠埃希菌才能代表人和动物粪便的污染。样本中捡出大肠菌群时，还得确认是否是大肠埃希菌。直接检查E.coli，一步到位，印度。64年我国食品卫生亦采用检查大肠埃希菌，一步到位。但多数采取检查大肠菌群，然后确定是否是粪便来源，二步到位。2.检查大肠菌群乳糖发酵的4类菌，其卫生学意义是相同的，都是来自人和动物的粪便污染，检查大肠菌群即可。WHO50年来一贯的方法，在大多数国家推行。为了与国际接轨，我国食品卫生74年开始采用国际通用的大肠菌群检查法。3.只要是发酵型的细菌，便可认为是大肠菌群。采用葡萄糖发酵试验检测，包括了肠杆菌科所有的细菌。前苏联20世纪50年代引入我国，一直沿用到20世纪60年代初期。?**05版微生物限度检查法增修订内容中国药典2005版微生物限度检查法增修定内容05版微生物限度检查法增修订内容中国药典2005版微生物限度检查法在检查项目、格式、语言表述等方面都有较多的增定和修订。增订中主要的有四项：一是三菌数测定的方法验证；二是控制菌检查的方法验证；三是大肠菌群检查法；四是梭菌检查法。前言增订●微生物限度检查在环境的洁净度10000级和局部100级的单向流空气区域内进行，其全过程应严格遵守无菌操作，以防再污染。单向流空气区域、工作台面及环境必须定期按国家《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌测试方法》现行标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。05版微生物限度检查法增修订内容●培养基、稀释剂、实验器具等的灭菌，按灭菌法（见附录XVII）的要求采用验证合格的灭菌程序灭菌。(培养基配制、灭菌、质量与使用)培养温度细菌和控制菌的培养温度未改动。霉菌和酵母菌的培养温度20-25℃改为23-28℃。抽样量和检验量虽分别单列，但突出的是检验量。以检验量为标题，抽样量列在检验量叙述完了之后。