DB34T 1539-2011 禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR 法.pdfVIP

ICS07.100.30

C53

DB34

安徽省地方标准

DB34/T1539—2011

禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法

TestingforSalmonellainPoultryeggsQualtativepolymerasechainreaction(PCR)

method

2011-11-15发布2011-12-15实施

安徽省质量技术监督局发布

DB34/T1539—2011

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心提出。

本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。

本标准主要起草人：陈戈、张波、汪永信、安虹、刘娟娟、程潇。

I

DB34/T1539—2011

禽蛋中沙门氏菌的检测-荧光PCR法

1范围

本标准规定了禽蛋中沙门氏菌的荧光PCR检测方法。

本标准适用于禽蛋及禽蛋制品中沙门氏菌的快速检测。

本标准适用于该产品的风险预警监测及相关科学研究。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验

GB/T4789.19食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

CT值

PCR扩增过程中荧光信号强度达到阈值所需要的循环数。

4方法原理

本方法是基于TaqMan实时荧光PCR技术，选取沙门氏菌种属特异性的invA基因序列设计引物和

两端有荧光基团标记的寡核苷酸探针。PCR每进行一次循环，PCR产物的量与荧光信号的强度呈对应关

系，当荧光信号超过所设定的阈值时，荧光信号可被检测出来。通过观察实时PCR扩增曲线，对样品

中的沙门氏菌进行快速检测。

5设备和材料

5.1实时荧光PCR仪。

5.2离心机。

5.3微量移液器和灭菌吸头（10μL、100μL、200μL、1000μL）。

5.4恒温培养箱。

5.5恒温水浴锅。

1

DB34/T1539—2011

5.6天平：感量为0.1g。

5.7均质器或乳钵。

5.8灭菌三角烧瓶(500mL、250mL)。

5.9灭菌吸管（10mL、1mL）。

5.10灭菌平皿（90mm×15mm）。

5.11灭菌试管（内径16mm，长160mm）。

5.12接种棒、镍铬丝。

5.13试管架、试管篓。

6试剂

6.1除另有规定外，水应符合GB/T6682中一级水的规格，且为灭菌双蒸水，试剂为分析纯或生化试

剂。所有试剂均用无DNA酶污染的容器分装。

6.2TaqDNA聚合酶。

6.3dNTP:dATP、dTTP、dCTP、dGTP。

6.