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改变敏感酶的作用机制选育抗代谢类似物的变异株,也是提高某些代谢产物产量的措施。第63页,共65页,星期六,2024年,5月改变细胞的透性一方面注意筛选细胞膜通透性强的野生菌株。另一方面对于通过诱变选育出来的突变体要注意控制发酵条件,以提高细胞膜的透性。第64页,共65页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第65页,共65页,星期六,2024年,5月**酶变构调节作用有些酶分子除了具有活性中心(结合部位和催化部位)外,还存在一个特殊的调控部位,即变构中心。变构中心虽然不是酶活性中心的组成部分,但它可以与某些化合物(称为变构剂)发生非共价结合,引起酶分子构象的改变,对酶起到激活或抑制的作用。这类酶通常称为变构酶,由于变构剂与变构中心的结合而引起酶活性改变的现象则称为变构调节作用。第31页,共65页,星期六,2024年,5月目前已知的变构酶均为寡聚酶,含两个或两个以上的亚基,一般分子量较大,而且具有复杂的空间结构。大多数由变构酶催化的反应不遵守米氏方程,由变构剂所引起的抑制作用也不服从典型的竞争性或非竞争性抑制作用的数量关系。第32页,共65页,星期六,2024年,5月变构剂可以分为两类激活变构剂:变构剂与酶分子结合后,酶的构象发生了变化,这种新的构象有利于底物分子与酶的结合,使酶促反应速度提高。抑制变构剂:变构剂与酶分子结合所引起的酶的构象变化不利于与底物的结合,表现出一定程度的抑制作用。实验发现,在变构酶中起催化作用,称为催化亚基;与变构剂结合的对反应起调节作用,称为调节亚基。第33页,共65页,星期六,2024年,5月共价修饰调控某些酶分子上的基团可以在另一种酶催化下发生共价修饰作用(例如磷酸化或去磷酸化作用),从而引起酶活性的激活或抑制。这种作用称为共价修饰作用。这类酶则称为共价调节酶。有如下两个特点:被修饰的酶可以有两种互变形式,即一种为活性形式(具有催化活性),另一种为非活性形式(无催化活性)。正反两个方向的互变均发生共价修饰反应,并且都将引起酶活性的变化。共价修饰调节作用可以产生酶的连续激活现象,所以具有信号放大效应。例如肾上腺素引起糖原分解过程中的一系列磷酸化激活步骤,其结果将激素的信号被逐级放大了约300万倍。第34页,共65页,星期六,2024年,5月共价修饰第35页,共65页,星期六,2024年,5月第四节基因表达调控第36页,共65页,星期六,2024年,5月基因表达转录调控方式原核生物以操纵子为单元进行表达和调控,特异的阻遏蛋白是控制原核启动序列活性的重要因素。第37页,共65页,星期六,2024年,5月I-调节基因P-启动子O-操作子(操作基因)Z、Y、A-三种结构基因乳糖操纵子的调节机制第38页,共65页,星期六,2024年,5月阻遏蛋白的负性调节当无诱导物乳糖存在时,调节基因编码的阻遏蛋白(repressorprotein)处于活性状态,阻止RNA聚合酶与启动基因的结合,则无法启动转录。当有乳糖存在时,lac操纵子(元)即可被诱导。乳糖进入细胞,经β-半乳糖苷酶催化,转变为半乳糖。后者作为一种诱导剂分子结合阻遏蛋白,使蛋白构象变化,导致阻遏蛋白与O序列解离、转录发生。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用第39页,共65页,星期六,2024年,5月CAP(代谢产物活化蛋白)的正性调节当没有葡萄糖及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP结合,这时CAP结合在lac启动序列附近的CAP位点,可刺激RNA转录活性。葡萄糖的分解代谢产物能抑制腺苷酸环化酶活性并活化磷酸二酯酶,从而降低了cAMP的浓度,CAP不能被活化形成CAP-cAMP复合物,则不能转录。第40页,共65页,星期六,2024年,5月lac阻遏蛋白负性调节与CAP正性调节两种机制协调合作:当Lac阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥作用;但是如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解聚仍几无转录活性。lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖。第41页,共65页,星期六,2024年,5月调节基因操纵基因结构基因mRNA酶蛋白调节基因操纵基因结构基因辅阻遏物trp阻遏蛋白原调节基因编码的阻遏蛋白原不与操作基因结合,结构基因转录。Trp或Trp-RNA与阻遏蛋白结合,使之构象发生变化与操纵基因结合,结构基因不能表达。阻遏物调节机制色氨酸操纵子的调节机制第42页,共65页,星期六,2024年,5月大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用衰减子:在转录水平上调节基因表
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