皮肤性病学02实验室检查和辅助检查.pptx

•自学

皮肤组织病理学

其他常用实验室技术

•第一节免疫组化技术

•第二节真菌检查

•第三节变应原检测

•第四节滤过紫外线检查

•第五节性病检查

•第六节蠕形螨、疥螨和阴虱检查

•第七节分子生物学技术

第一节免疫组化技术

一、适应证

大疱性皮肤病、结缔组织病等自身免疫性皮肤病、

某些感染性皮肤病及皮肤肿瘤的诊断和鉴别诊断。

二、方法、原理及结果分析

a、直接免疫荧光法（DIF）

b、间接免疫荧光法（IIF）

c、免疫酶标法

•a、直接免疫荧光法（DIF）：主要用于检测病变组织或细胞中存

在的抗体或补体。将冷冻切片组织固定于玻片上，滴加荧光素标

记的抗人免疫球蛋白或抗体C3抗体，经孵育、清洗等处理后，置

于荧光显微镜下观察。若组织中有抗人免疫球蛋白或C3沉积，则

荧光抗体与之结合呈现荧光。

•荧光显示的部位通常为棘细胞膜、皮肤基底膜带、血管壁。

q棘细胞间：天疱疮皮损可见棘细胞间IgG、IgA、IgM或

C3沉积呈网状。

q皮肤基底膜带：

①红斑狼疮：基底膜带90%以上出现IgG、C3沉积，

呈颗粒状

②类天疱疮：基底膜带90%以上出现IgG、C3沉积，

呈线状

③线性IgA大疱病：IgA线状沉积于基底膜带。

q血管壁：多种皮肤血管炎的皮肤血管壁有IgM、C3沉积，

皮肌炎的病变肌肉间质血管壁有IgM、C3沉积。

天疱疮棘细胞间荧光呈网状沉积

b、间接免疫荧光法

•主要用于检测血清中血清中存在的自身抗体，并可做抗体滴度测

定。底物取自正常人皮肤或动物组织，将患者血清滴于底物上，

再滴加荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体等，荧光显微镜下观察。

若血清中存在循环自身抗体，荧光标记的抗人球蛋白抗体即可与

结合到底物上的抗体结合，呈现荧光。

c、免疫酶标法

•机制与间接免疫荧光法类似，主要标记细胞的某种特异性成分，

可用于肿瘤的鉴别诊断。

第二节真菌检查

•一、采集标本：

1、浅部真菌的标本：毛发、皮屑、甲屑、痂。

2、深部真菌的标本：痰、尿液、粪便、脓液、口腔、

或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织。

•二、检查方法

1、直接涂片：取标本置玻片上，加一滴10%KOH溶液，盖上盖玻

片→酒精灯上微热→轻压盖玻片使标本透明→低倍镜下检查有无菌

丝及孢子→高倍镜下证实。此法不能确定菌种。

2、墨汁涂片：用于检查隐球菌及其他有荚膜的的孢子。取一

小滴墨汁与标本混合，盖上盖玻片后直接镜检。

3、涂片或组织切片染色：染色可更好地显示真菌形态和结构。

革兰染色适应于白念、孢子丝菌等，瑞氏染色适应于组织包浆菌，

PAS染色可将多数真菌染成红色。

4、培养检查：使真菌检出率高，确定菌种。标本→接种于葡

萄糖蛋白胨琼脂培养基上→室温或37℃下培养1-3周→鉴定菌种。

第三节变应原检测

•一、斑贴试验

根据受试物的性质配制适当浓度的浸液、溶液、软膏或原物作为试剂，

以适当的方法将其贴于皮肤，一定时间后观察机体是否对其产生超敏反应。临

床上用于检测IV型超敏反应。

适应症：接触性皮炎、职业性皮炎、手部湿疹、化妆品

皮炎

方法：受试物→制成浸液、溶液、软膏或原物→置于4层1cm×1cm纱布上，用稍

大透明玻璃纸覆盖，周边固定。同时做多个不同试验物时，用铝制小室斑试器

→贴于背部或前臂屈侧，每两个间隔大于4cm。并设阴性对照。

结果及意义：一般在48小时去除斑贴，间隔30分钟观察结果。

①受试部位无反应为（–）

②皮肤有淡红斑为可疑反应（±）

③出现轻度红斑、浸润及少量丘疹为阳性（+）

④出现水肿性红斑、丘疹或水疱为强阳性（++）

⑤显著红肿或浸润聚合性水疱或大疱为超强阳性反应（+++）

临床意义：阳性者说明患者对受试物过敏，但应排除原发性刺激或假阳性反应；

原发刺激反应除去受试物皮肤反应会减弱；真阳性反应除去受试物后24-48小时

反应增强。

•注意事项：不宜在皮肤病急性发作期间进行试验，不宜

用高浓度的原发性刺激物测试；受试前至少1周及受试期

间避免使用糖皮质激素或免疫抑制剂，受试前3天或受试

期间避免使用抗组胺药物，以免出现假阴性；受试期间

避免淋浴淋湿斑贴、避免过度牵拉斑贴部位或过度体力

活动；可