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马铃薯CPP家族特征及

StCPP-3基因参与青枯病相关的功能研究

中文摘要

CPP是一种广泛存在于动植物中富含半胱氨酸的多梳样蛋白（cystein-richpolycomb-

likeprotein，CPP），在控制细胞分裂、发育调节及相应的生物和非生物胁迫应答等方面

发挥着重要作用。然而有关CPP基因在马铃薯青枯病（bacterialwilt，Ralstonia

solanacearum）中的作用尚未见报道。

本文对马铃薯CPP基因家族进行了全基因组范围的生物信息学分析，并在此基础

上研究了StCPP-3基因的青枯菌诱导的表达模式，进一步利用基因功能损益策略探讨了

StCPP-3调节马铃薯对青枯病抗性的机制。实验结果如下：

（1）克隆到一个马铃薯CPP基因StCPP-3，全长1866bp，编码621个氨基酸，包

含两个CXC1结构域；

（2）生物信息学分析鉴定出马铃薯参考基因组中存在5个StCPP基因，分别定位于

5条染色体上，编码12个转录本。系统发育和保守结构域分析将12个StCPP蛋白归类

为4个分支。启动子的顺式作用元件分析结合基于RNAseq数据的表达热图表明StCPP

基因参与调控植物生长发育，应答多种生物和非生物胁迫。

（3）利用qRT-PCR技术检测StCPP-3在青枯菌、四种植物激素（ABA，SA，MeJA

和BR）处理后的基因转录水平，结果表明StCPP-3基因在较短时间内迅速且强烈响应

青枯菌的诱导表达；MeJA和ABA可以显著诱导StCPP-3基因上调表达，StCPP-3基因

在SA和BR激素处理下StCPP-3基因表达量降低；在高盐和冷胁迫下，StCPP-3基因

转录水平降低。

（4）亚细胞定位结果显示StCPP-3定位在细胞核上。

（5）利用病毒介导的基因沉默（VIGS）本氏烟草的StCPP-3的同源基因NbCPP-3，

可以显著限制青枯菌在烟草体内生长且赋予其对青枯病的耐受性。

（6）组成型过表达拟南芥转基因品系StCPP-3-OE1和StCPP-3-OE2表现出在青枯菌

胁迫下具有更高的致病率，防御相关的ROS清除酶类活性降低。另外发现，OE品系中

病程相关蛋白PR1表达受到明显的抑制，这些结果表明表明StCPP-3负调控植物对青

枯病的抗性。

（7）通过酵母双杂交筛选到StCPP-3与青枯菌III型效应子系统调控子HrpB7蛋白互

作，据此进行了酵母双杂交点对点互作验证和萤火素酶互补实验验证了StCPP-3与

HrpB7蛋白的互作。

以上结果表明CPP基因参与马铃薯与青枯病的相互作用，StCPP-3基因可能通过

抑制青枯菌诱导的过敏性细胞死亡、减弱抗氧化酶系统的活性、降低PR1基因的表达而

负调控马铃薯对青枯菌的抗性。这些实验结果有望对进一步阐明CPP基因应答青枯菌

感染的分子机制提供帮助。

关键词：马铃薯；CPP；青枯病；抗性；基因表达

CharacteristicanalysisoftheCPPgenefamilyinpotatoandthe

functionofStCPP-3inbacterialwilt

ABSTRACT

CPPisacysteine-richpolycomb-likeprotein(cystein-richpolycomb-likeprotein,CPP)

thatexistswidelyinanimalsandplants.Itplaysanimportantroleincontrollingcelldivision,

developmentalreguLationandcorrespondingbioticandabioticstressresponses.However,the

roleofCPPgeneinpotat