微生物的纯培养及显微技术课件.ppt

2微生物的纯培养及显微技术（3）干燥保藏法●原理：干燥使其代谢停止（减少水分）。●方法：★沙土管保存：适用于产孢子的微生物如芽孢杆菌、放线菌等。特点：简便易行，并可以将微生物长期保藏。适合于一般实验室及以放线菌等为菌种的发酵工厂采用。★冷冻真空干燥保存：冷冻干燥样品在真空或惰性气体密闭环境中保存，使其生命活动处于休眠，可以达到长期保存的目的。特点：用冰升华除去水分手段比较温和，细胞受损伤的程度相对较小，存活率及保藏效果不错，同时邮寄和使用方便。它是目前使用最普遍、也是最重要的的微生物保藏方法。2微生物的纯培养及显微技术（4）其它方法●各种微生物保藏的方法还很多，如纸片保藏、薄膜保藏、寄主保藏等。总之●不同的微生物对不同保藏方法有不同的适应性，迄今还没有一种方法被证明对所有的微生物都适应。●对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因某种方法失败而导致菌种的丧失。2微生物的纯培养及显微技术Sect2显微镜和显微技术一、显微镜的种类及其原理一）光学显微镜1、普通光学显微镜（lightmicroscope)●适于观察染色的标本2、暗视野显微镜（dark-fieldmicroscope)●适于观察细菌的运动性3、相差显微镜（phasecontrastmicroscope)2微生物的纯培养及显微技术●通过特殊的光学装置——环状光阑和相差板，利用光的的干涉现象，将光的相位差转变成肉眼可以觉察的振幅差（明暗差），从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异，对比度增强。●适于观察不染色的活细胞及细胞内的某些细微结构。4、荧光显微镜（fluorescencemicroscope)●原理：是紫外线、荧光素（如FITC）、抗体分子（必要时）一起工作的显微镜。标本用用荧光素覆盖，紫外线直接照射标本。紫外线将荧光染料中的电子激发，使之呈高能量水平。然后电子返回到它们初发的能量水平时，通过发射不同颜色的光来释放额外的能量。●在免疫学、环境微生物学、分子生物学中应用十分普遍如抗原组织定位等。2微生物的纯培养及显微技术普通光学显微镜的分辨率为0.25um。一般细菌都大于0.25um，故可用普通光学显微镜观察。2微生物的纯培养及显微技术暗视野显微镜2微生物的纯培养及显微技术相差显微镜2微生物的纯培养及显微技术荧光显微镜2微生物的纯培养及显微技术（一）形态和染色球状杆状螺旋状基本形态2微生物的纯培养及显微技术一、细胞的形态构造及其功能（一）形态和染色1、球状细胞个体呈球形或椭圆形，不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式，常被作为分类依据。2微生物的纯培养及显微技术一、细胞的形态构造及其功能（一）形态和染色2、杆状细胞呈杆状或圆柱形，一般其粗细（直径）比较稳定，而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。2微生物的纯培养及显微技术枯草芽孢杆菌地衣芽孢杆菌2微生物的纯培养及显微技术铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）2微生物的纯培养及显微技术结核分枝杆菌Mycobacteriumtuberculosis*2微生物的纯培养及显微技术Chapter2微生物的纯培养及显微技术Sect1微生物的分离和纯培养一、前言二、微生物操作基本技术——无菌技术三、微生物的分离和纯培养四、微生物的保藏技术2微生物的纯培养及显微技术一、前言1、微生物研究对象：群体2、研究基础：1）纯培养技术：把特定的微生物从自然界混杂存在的状态中分离、纯化出来的技术。●培养物：在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体称为培养物。●纯培养物：只有一种微生物的培养物。2）显微技术：包括显微标本的制作、观察、测定、分析和记录。2微生物的纯培养及显微技术培养基2微生物的纯培养及显微技术二、微生物操作基本技术——无菌技术1、微生物培养的