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果味露中着色剂的分离与鉴定实验报告

一、目的与要求：

1、明确测定各类色素的原理与方法。

2、通过此实验掌握纸层析定性法与提纯色素的定量法。

二、原理：

聚酰胺是具有二极性的化合物，水溶性酸性染料在酸性条件下被

聚酰胺吸附，而在碱性条件下解吸附，再用纸色谱法或薄层色谱法进

行分离后与标准比较定性、定量。

三、试剂：

1、聚酰胺粉(尼龙6)

2、硫酸1：10

3、甲醇—甲酸溶液：6：4

4、甲醇

5、20%柠檬酸溶液

6、10%钨酸钠溶液

7、石油醚：沸程60-90℃

8、海砂：先用l：10盐酸煮沸15min，用水洗中性，再用5%氢

氧化钠溶液煮沸15min，再于105℃干燥，贮于具玻璃塞的瓶中，备

用。

9、乙醇-氨溶液：取1毫升氨水，加70%乙醇至100毫升。

10、50%乙醇溶液

11、硅胶G。

12、PH6的水：用20%柠檬酸调节至PH6。

13、盐酸:1：10

14、5%氢氧钠溶液

15、碎瓷片：处理方法同海砂

16、展开剂

a、正丁醇-无水乙醇-1%氨水(6：2：3)：供纸色谱用。

b、正丁醇-吡啶-1%氨水(6：3：4)：供纸色谱用。

c、甲乙酮-丙酮-水(7：3：3)：供纸色谱用。

d、甲醇-乙二胺-氨水(10：3：2)：供薄层色谱用。

e、甲醇-氨水-乙醇(5：1：10)：供薄层色谱用。

f、2.5%柠檬酸钠-氨水-乙醇(8：1：2)供薄层色谱用。

17、色素标准溶液{以下商品作为标准以100%计。

胭脂红：纯度60%;苋菜红：纯度60%;柠檬黄：纯度60%;靛蓝：

纯度40%;日落黄：纯度60%，亮蓝;纯度60%。

精密称取上述色素各0.100克，用PH6的水溶解，移入100毫升

容量瓶中并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1毫克商品色素。靛蓝

溶液需在暗处保存。

18、色素标准使用液：用时吸取色素标准溶液各5.0毫升，分别

置于50毫升容量瓶中，加PH6的水稀释至刻度。此溶液每毫升相当

于0.1毫克商品色素。

四、仪器：

1、分光光度计

2、微量注射器或色素吸管

3、展开槽，25X6x4cm

4、层析缸

5、滤纸、中速滤纸，纸色谱用

6、薄层板：5X20em

7、电吹风机

8、水泵

五、操作方法：

1、样品处理

A、果味水、果子露、汽水：吸取50.0毫升样品于100毫升烧杯

中，汽水需加热驱除二氧化碳。

B、配制酒：吸取100.0毫升样品于烧杯中，加碎瓷片数块，加

热驱除乙醇。

C、硬糖：蜜饯类，淀粉软糖：称取5.0或10.0克粉碎的样品，

加30毫升水，温热溶解，若样液PH值较高，用20%柠檬酸溶液调至

PH4左右。

D、含蛋奶的样品

(1)奶糖：称取10.0克粉碎均匀的样品，加30毫升乙醇-氨溶液

溶解，置水浴上浓缩至约20毫升，立即用1：10硫酸调溶液至微酸

隆再加1.0毫升1：l0硫酸，加1毫升l0%钨酸钠溶液，使蛋白质沉

淀，过滤，用少量水洗涤，收集滤液。

(2)蛋糕类：称取10.0克粉碎均匀的样品，加海砂少许，混匀、

用热风风干样品(用手摸已干燥即可以)，加入30毫升石油醚搅拌，

放置片刻，倾出石油醚，如此重复处理三次，以除去脂肪吹干后研细，

全部转人G3垂融漏斗或普通漏斗中，用乙醇—氨溶液提取色素，直

至色素全部提完以下按(1)自“置水浴下浓缩至约20毫升”起依法操

作。

2、吸附分离

将处理后所得的溶液加热至70℃，加入0.5-1.0克聚酰胺粉充

分搅拌，用20%柠檬酸溶液调PH至4，使色素完全被吸附，若溶液还

有颜色，可以再加一些聚酰胺粉。将吸附色素的聚酰胺全部转入G3

垂融漏斗或玻璃漏斗中过滤(如用G3垂融漏斗过滤，可以用水泵慢慢

地抽滤)。用20%柠檬酸酸化PH=4的70℃水反复洗涤，每次20毫升，