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A、酸水解常用6mol/L的盐酸或4mol/L的硫酸在105-110℃条件下进行水解,反应时间约20小时。此法的优点是不容易引起水解产物的消旋化。缺点是色氨酸被沸酸完全破坏;含有羟基的氨基酸如丝氨酸或苏氨酸有一小部分被分解;天冬酰胺和谷氨酰胺侧链的酰胺基被水解成了羧基。第63页,共69页,星期六,2024年,5月B、碱水解一般用5mol/L氢氧化钠煮沸10-20小时。由于水解过程中许多氨基酸都受到不同程度的破坏,产率不高。部分的水解产物(主要指含-OH和-SH的氨基酸,如,Ser、Thr、Tyr、Cys等)发生消旋化。该法的优点是色氨酸在水解中不受破坏。第64页,共69页,星期六,2024年,5月C、酶水解目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶或称蛋白酶(proteinase)已有十多种。应用酶水解多肽不会破坏氨基酸,也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。最常见的蛋白水解酶有以下几种:胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等。第65页,共69页,星期六,2024年,5月氨基酸的分配层析纸层析薄层层析离子交换层析高效液相层析第66页,共69页,星期六,2024年,5月利用酸碱性质的不同可以将氨基酸分离与纯化离子交换色谱法纯化氨基酸混合物第67页,共69页,星期六,2024年,5月A、氨基酸样品的离子交换色谱研究第68页,共69页,星期六,2024年,5月感谢大家观看第69页,共69页,星期六,2024年,5月**************************************************精氨酸Arginineα-氨基-δ-胍基戊酸R一、脂肪族氨基酸(碱性aa)第31页,共69页,星期六,2024年,5月精氨酸Arginine赖氨酸Lysineα,ε-二氨基己酸K一、脂肪族氨基酸(碱性aa)第32页,共69页,星期六,2024年,5月精氨酸是碱性最强的氨基酸,侧链上的胍基是已知碱性最强的有机碱,pKa值为12.48,生理条件下完全质子化。赖氨酸的侧链上含有一个氨基,侧链氨基的pKa为10.53。生理条件下,Lys侧链带有一个正电荷(—NH3+),同时它的侧链是4个C的直链,柔性较大,使侧链的氨基反应活性增大。注意:第33页,共69页,星期六,2024年,5月二、芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine(α-氨基-β-苯基丙酸)F第34页,共69页,星期六,2024年,5月二、芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine酪氨酸Tyrosine(α-氨基-β-对羟苯基丙酸)Y第35页,共69页,星期六,2024年,5月二、芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine酪氨酸Tyrosine色氨酸Tryptophan(α-氨基-β-吲哆基丙酸)W第36页,共69页,星期六,2024年,5月三、杂环族氨基酸组氨酸Histidineα-氨基-β-咪唑基丙酸H第37页,共69页,星期六,2024年,5月三、杂环族氨基酸组氨酸Histidine脯氨酸Prolineβ-吡咯烷基-α-羧酸P第38页,共69页,星期六,2024年,5月组氨酸含咪唑环,咪唑环的pKa在游离氨基酸中和在多肽链中不同,前者pKa为6.00,后者为7.35,它是20种氨基酸中侧链pKa值最接近生理pH值的一种,在接近中性pH时,可离解平衡。它是在生理pH条件下唯一具有缓冲能力的氨基酸。脯氨酸是唯一的一种环状结构的氨基酸,它的α-亚氨基是环的一部分,因此具有特殊的刚性结构。它在蛋白质空间结构中具有极重要的作用,一般出现在两段α-螺旋之间的转角处,Pro残基所在的位置必然发生骨架方向的变化。注意:第39页,共69页,星期六,2024年,5月根据氨基酸侧链的极性可以分为非极性氨基酸和极性氨基酸。极性氨基酸又可分为不带电荷的极性氨酸、酸性氨基酸和碱性氨基酸。第40页,共69页,星期六,2024年,5月非极性氨基酸(八种)第41页,共69页,星期六,2024年,5月不带电何的
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