第十单元　专题突破10　综合PCR的基因工程问题.docx

一、选择题

1．(2024·厦门高三质检)如图表示PCR过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R表示方向。下列叙述正确的是()

A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板

B．PCR过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制

C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③

D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经2次循环才可获得该序列的双链产物

2．(2024·重庆高三质检)不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法，如图所示。不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物，两者的比例通常为1∶100，PCR反应最初的若干次循环中，其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA)，但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA。下列相关说法错误的是()

A．用不对称PCR方法扩增目的基因时，不需要知道基因的全部序列

B．进行最初若干次循环的目的是增加模板DNA的量

C．最后大量获得的ssDNA与图中乙链的碱基序列一致

D．因为双链DNA和单链DNA的分子量大小不同，可通过电泳方法将其分离

3．(2024·无锡高三模拟)重叠延伸PCR可实现定点基因诱变，其操作过程如图所示(凸起处代表突变位点)。下列说法正确的是()

A．过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率

B．过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物

C．过程②的产物都可以完成延伸过程

D．若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP2

4．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列(图中L、R)进行扩增的技术，其过程如图所示。下列相关叙述不正确的是()

A．过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割

B．过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键

C．过程③PCR体系需要添加耐高温的DNA聚合酶和解旋酶

D．该技术可检测T－DNA整合到植物染色体DNA的位置

5．IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。临床上发现某重症联合免疫缺陷(SCID)患儿的IKKβ基因编码区第1183位碱基T突变为C。为研究该患儿发病机制，研究人员应用大引物PCR定点诱变技术获得突变基因，如图所示。下列说法错误的是()

A．PCR1中使用的引物有引物A、引物C

B．PCR2中使用的引物有引物B、大引物b链

C．PCR1过程需要扩增3轮才能获得目标产物

D．PCR2过程中，为减少错误DNA片段的产生可适当升高复性温度

6.(2024·安顺高三调研)荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，用于病毒检测。其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成(如图)。通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数)。下列相关叙述错误的是()

A．PCR每个循环包括变性、复性(引物和模板结合)、延伸3个阶段

B．耐高温的DNA聚合酶在该反应中的作用是形成磷酸二酯键

C．最终监测的荧光强度与起始时反应管内样本DNA的含量呈正相关

D．Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高

7．(2024·襄阳高三模拟)通过设计引物，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2的5′端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述不正确的是()

A．引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入

B．复性温度过高会导致引物不能与模板牢固结合，PCR扩增效率下降

C．第3轮PCR，引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因

D．第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/2

8．(2024·南通高三调研)如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T－DNA插入的具体位置。下列有关说法错误的是()

A．农杆菌在自然条件下主要侵染双子叶植物和裸子植物，T－DNA存在于其Ti质粒上

B．利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列

C．若扩增循环n次，需要2n＋1－2个引物

D．将扩增出的未知序列与水稻基因组序列比对可确定T－DNA的插入位置

9．实时荧光定量RT－PCR技术需要在常规PCR基础上添加荧光染料或荧光探针，荧光染料能特异性掺入DNA双链中，从而发出荧光信号。在流感流行季节，对怀疑流感