核酸的结构与功能(生物化学课件).pptx

核酸的分子组成;RNA含磷8.5%-9%

DNA含磷9%-10%;;;（一）戊糖是核苷酸组分之一;类别;嘌呤碱：A(adenine)、G(guanine)

嘧啶碱：C(cytosine)、T(thymine)、

U(uracil)

稀有碱基：甲基化衍生物

;碱基中含共轭双键，对260nm左右的紫外光有较强的吸收，可用于定性定量分析。;腺苷(AR)脱氧胞苷(dCR);三、碱基与戊糖相连形成核苷，核苷与磷酸连接形成核苷酸;游离存在的多为5’-核苷酸;DNA的空间结构与功能

;DNA的空间结构与功能;1.DNA的二级结构——双螺旋结构模型;对DNA双螺旋结构模型作出贡献的科学家;ErwinChargaff(1905-2002)

Chargaff研究发现了DNA碱基的配对规律，也就是A必须与T配对，G和C配对。——Nature,2003;罗萨琳.富兰克林;目前已知DNA双螺旋结构可分为A、B、C、D及Z型等数种，除Z型为左手双螺旋外，其余均为右手双螺旋。;B型双螺旋DNA的结构特征;1.为右手反平行双螺旋

2.磷酸和脱氧核糖位于螺旋外侧，碱基位于内侧

3.螺距为3.4nm，直径为2nm

碱基平面与螺旋纵轴垂直

4.两条链间存在碱基互补：A与T或G与C配对形成氢键，称为碱基互补原则

5.螺旋的稳定因素为氢键和碱基堆砌力

;共价封闭的环状双螺旋;核小体、染色质与染色体;3.DNA的功能;RNA的空间结构与功能

;RNA的结构与功能;信使RNA(messengerRNA,mRNA)是合成蛋白质的模板。

不均一核RNA(hnRNA)含有内含子(intron)和外显子(exon)。

外显子是氨基酸的编码序列，而内含子是非编码序列。

hnRNA经过剪切后成为成熟的mRNA。;;从AUG开始，每三个核苷酸为一组编码了一个氨基酸，称为三联体密码(codon)。

成熟的mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。

5?-末端的帽子(cap)结构和3?-末端的多聚A尾(poly-Atail)结构。;帽子结构:m7GpppNm;;真核生物的mRNA的3?-末端转录后加上一段长短不一的聚腺苷酸。;;mRNA核内向胞质的转位

mRNA的稳定性维系

翻译起始的调控;（2）mRNA依照自身的碱基顺序指导蛋白质氨基酸顺序的合成;（4）mRNA的成熟过程是hnRNA的剪接过程;转运RNA(transferRNA,tRNA)在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体,将氨基酸转呈给mRNA。

由74～95核苷酸组成；

??细胞总RNA的15%；

具有很好的稳定性。;;tRNA具有局部的茎环(stem-loop)结构或发卡(hairpin)结构。;tRNA二级结构类似上面的三叶草结构;tRNA1.二级结构为三叶草型

2.三级结构为倒Ｌ型;;tRNA的3?-末端都是以CCA结尾。

3?-末端的A与氨基酸共价连结，tRNA成为了氨基酸的载体。

不同的tRNA可以结合不同的氨基酸。;tRNA的反密码子环上有一个由三个核苷酸构成的反密码子(anticodon)。

tRNA上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。;核蛋白体RNA(ribosomalRNA，rRNA)是细胞内含量最多的RNA(80％)。

rRNA与核蛋白体蛋白结合组成核蛋白体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。;核蛋白体的组成;;;;核酸的理化性质;1.核酸的酸碱及溶解度性质

核酸为两性电解质，含有酸性的磷酸基和碱性的碱基。

磷酸基的酸性较强，故核酸分子通常表现为酸性。

属于极性化合物，微溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂

2.核酸的高分子性质

粘度：DNARNAdsDNAssDNA

沉降行为:不同构象的核酸分子的沉降的速率有很大差异，这是超速离心法提取和纯化核酸的理论基础。;核酸在波长260nm处有强烈的吸收，是由碱基的共轭双键所决定的。这一特性常用作核酸的定性和定量分析。;碱基的紫外吸收光谱;DNA或RNA的定量

A260=1.0相当于

50μg/ml双链DNA(dsDNA)

40μg/ml单链DNA(ssDNAorRNA)

20μg/ml寡核苷酸

确定样品中核酸的纯度

纯DNA:A260/A280=1.8

纯R