测序与疾病研究系列02高通量测序技术在肠道微生态研究中的应用.pptx

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解螺旋 | 陪伴医生科研成长;;解螺旋 | 陪伴医生科研成长;解螺旋 | 陪;知识金牌;宏基因组 知识金牌;知识金牌;知识金牌;解螺旋;;解螺旋 | 陪伴医生科研成长;;知识金牌;知识金牌;知识金牌;解螺旋 | 陪伴医生科研成长;研究思路与案例分享;针对疾病的分析方向;Doi:10.1038/nrmicro3451;研究思路;医口方案设计-简化方案;医口方案设计-完整方案;IBS患者和精神类疾病患者有类似的菌群信号

研究人群:

IBS患者(根据RomeIIIcriteria评估)

抑郁症患者(根据Mini-InternationalNeuropsychiatricInterview[MINI]DSM-IV评估)

样本:粪便样本

(n=45+15+25+20)

检测方法:16S多样性;临床症状和恒压器测试数据分析;IBS-D、抑郁症、COMO患者和健康人群群肠道菌群特征;拟杆菌和普氏菌分型分析;IBS-D、抑郁症和COMO患者肠型差异分析;结肠粘膜炎症与菌群信号(肠型)相关性分析

疫组化分析乙状结肠粘膜样本(24个I型、14个II型和23个III型样本,包括33位IBS-D、3位抑郁症、18位COMO患者和7位健康个体)MCP-1MIP-α、肥大细胞类胰蛋白酶和CD3+T细胞;案例分析内容;美吉客户文章

仁济医院马雄团队

IF=16.658

原发性胆汁性胆管炎患者肠道菌群改变并可以在UDCA治疗后部分恢复

测序项目:多样性

测序平台:IlluminaMiSeqPE300

样本类型:粪便

样本数量:193

分组设置:实验组、对照组、验证组

测序量:平均每个样本34,661cleanreads

doi.org/10.1136/gutjnl-2016-313332;PBC初治患者肠道菌群失调;利用12种PBC相关的属作为标记微生物区别疾病状态;UDCA治疗使得PBC肠道菌群失调部分改善

PBC富集的属Haemophilus, Streptococcus和

Pseudomonas在UDCA治疗后显著降低;

健康人中富集的四种属,有三种属

(Bacteroidetes,Sutterella和Oscillospira)在治疗后的患者中增加;

虽然治疗后Veillonella在患者肠道内并未降低,但其相对丰度在疗效欠佳的患者中显著高于疗效好的患者。;PBC患者菌群功能改变

16S功能预测分析;;样本来源:

196位中国人群(健康人、HTN、pHTN)对照组:41位健康人(年龄32-75)

pHTN组:56位高血压前期患者(年龄28-70)

HTN组:99位高血压患者(年龄28-69);文献案例5;;文献案例5;文献案例5;文献案例5;文献案例5;文献案例5;文献案例5;文献案例5;案例分析内容;;期刊名称;取样方法;粪便样品;取样方法;样本数量

1、小样本量可以设置10个以内,大样本量数十甚至上百都可以;

小样本量可以解释生物学现象;大样本量可以揭示现象背后的机理;

2、实验组样品数和对照组样品数保持相近;

3、样本数越多,统计意义越显著,生物学解释越清晰,说服力越强。

生物学重复

1、重复:生物学重复和技术重复;

2、至少3个生物学重复;

3、重复、平行、混样的设置。

样本信息采集(Metadata)

医口:年龄、性别、种族、地域以及体重、健康状态、抗生素、生化指标等临床指标。;

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