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非发酵菌的鉴定

定义：非发酵菌（nonfermenters）指一群需氧或兼性厌氧、不发酵糖类，能在普通培养基上

生长的革兰阴性杆菌。主要存在外界环境中，种类繁多，多为条件致病菌或医院内感染菌。

关于临床标本中NFB的意义，在混合培养物中见到时，必须考虑到患者的情况和标本

来源。一般来说，以纯培养方式分离自正常无菌部位的NFB，一定要鉴定到种并进行抗生

素敏感性试验。

目前CLSI中，K-B法除了假单胞菌属、不动杆菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克

霍尔德菌有抗生素敏感性实验的判断标准外，其他非发酵菌没有K-B法的标准。

一、鉴定原则：

1．血、无菌部位（脑脊液、胸水等），特殊病人，少见菌可用API-20NE或VIKETTWO-GN

卡鉴定。

2．其它部位如呼吸道标本、临床常见的非发酵，根据菌落形态、生化反应、抗生素耐

药谱等综合分析手工法鉴定即可。

二、非发酵性菌基本分类：

假单胞菌属Pseudomonasspp.（20多个临床上重要菌种中，铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌

和恶臭假单胞菌等最常见。）

不动杆菌属Acinetoacterspp.（最常分离的种鲍曼不动杆菌、鲁氏不动杆菌、溶血不动

杆菌等）

窄食单胞菌Stenotrophomonasspp.（嗜麦芽窄食单胞菌、非洲嗜麦芽窄食单胞菌）

伯克霍尔德菌Burkholderiaspp.（洋葱伯克霍尔德菌、唐菖蒲伯克霍尔德菌、类鼻疽伯克

霍尔德菌等）

鞘氨醇单胞菌属Sphingomonasspp.（少动鞘氨醇杆菌）

无色杆菌属Achromobacterspp.（木糖氧化无色杆菌）

希瓦氏菌属Shewanellaspp.（腐败希瓦氏菌海藻希瓦氏菌）

产硷菌属Alcaligenesspp.

黄杆菌属Flavoacteriumspp.

莫拉菌属Moraxellaspp.

罗尔斯通菌属Ralstoniaspp.

食酸菌属Acidovoraxspp.

丛毛单胞菌属Comamonasspp.

甲基杆菌属Methylobacteriumspp.

等还有一些未定名的菌群

三、辨认非发酵菌的基本要点

1.分离培养基上的菌落有以下情况初步考虑非发酵菌的存在

a.培养基上生长较差或中国蓝上不生长的阴性菌。（如艾肯菌属、心杆菌属、金氏杆菌属）

b.中国蓝平板上为不发酵乳糖的菌落，氧化酶阳性的高度怀疑非发酵菌。但并非所有的氧

化酶阳性的均为非发酵菌。如弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、巴斯德菌属等。

c.革兰阴性菌在三糖管上培养，底层和斜面均不变色，疑为非发酵菌。但容易受影响。

2.葡萄糖的利用大部分非发酵菌生长缓慢产生弱酸，而蛋白胨形成的产物即可升高培养

基的PH值，中和非发酵菌产生的弱酸性产物。根据他的代谢特点，用氧化-发酵培养基鉴

别分类该类菌。

附：氧化-发酵葡萄糖培养基（O-F培养基）配方

成分:蛋白胨0.8g氯化钠2.0g

三水磷酸氢二钾0.15g葡萄糖4.0g

琼脂1.1g蒸馏水400.0ml

方法:热溶,调PH7.1,加入1%溴麝香草酚兰酒精溶液1.2ml分装,

8磅15分钟,备用.

*（O-F培养基）蛋白胨与糖类比为0.2：1

实验室中根据氧化发酵葡萄糖的情况

发酵葡萄糖发酵菌肠杆菌科

弧菌科

非发酵菌氧化型

非氧化型

3．动力：鉴别分类的依据

动力阳性的非发酵菌主要有：

假单胞菌属、窄食单胞菌、伯克霍尔德菌、无色杆菌属、希瓦氏菌属、产硷菌属、鞘氨

醇单胞菌属（18-22℃）甲基杆菌属等

动力阴性的非发酵菌主要有：

不动杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属等

4．氧化酶试验：细