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2010药典微生物培训资料1.2.3控制菌检查用培养基适用性检查——抑制能力检查培养基抑制能力检查:接种不少于100cfu的试验菌于被检培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最长时间下培养,试验菌应不得生长。针对选择性培养基:胆盐乳糖培养基、胆盐乳糖发酵培养基、四硫磺酸亮绿培养基;(金黄色葡萄球菌)溴化十六烷基三甲胺琼脂培养基,亚碲酸盐肉汤培养基、卵黄氯化钠琼脂培养基,甘露醇氯化钠琼脂培养基,念珠菌显色培养基。(大肠埃希菌)2010药典微生物培训资料1.2.3控制菌检查用培养基适用性检查——指示能力检查固体培养基指示能力检查:取试验菌各0.1ml(含菌数不大于100cfu)分别涂布于被检培养基和对照培养基平板上,在相应控制菌检查规定的培养温度及时间下培养。被检培养基中试验菌生长的菌落形态、大小、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。针对鉴别培养基2010药典微生物培训资料1.2.3控制菌检查用培养基适用性检查——指示能力检查液体培养基指示能力检查:分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基中,在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。与对照培养基管比较,被检培养基管试验菌生长情况、指示剂反应等应与对照培养基一致。针对鉴别培养基2010药典微生物培训资料典型特征大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB,曙红亚甲蓝)上典型特征2010药典微生物培训资料典型特征黑曲霉和白色念珠菌在玫瑰红钠琼脂RoseBengalAgar上典型特征2010药典微生物培训资料典型特征金黄色葡萄球菌在甘露醇氯化钠MannitolSaltAgar琼脂上典型特征2010药典微生物培训资料典型特征沙门氏菌在SS琼脂上沙门氏菌在BS琼脂(亚硫酸铋琼脂)上2010药典微生物培训资料培养基质量控制(2010版药典)实验室配制的培养基的常规监控项目pH适用性检查试验定期的稳定性检查以确定有效期2010药典微生物培训资料2.菌种的质量控制
2.1概念标准菌株:由国内或国际菌种保藏机构保藏的,遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。标准储备菌株:由标准菌株经一次传代得到的培养物。商业派生菌株:由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。代:将活的微生物接种到新鲜培养基中进行培养,并希望获取新的微生物培养物。这种操作方式,新培养物对接种培养物而言就称为一代。工作菌株:由标准储备菌株经传代得到的培养物。2010药典微生物培训资料中国医学菌种保藏中心提供的标准菌株2010药典微生物培训资料美国国家菌种保藏中心提供的标准菌株2010药典微生物培训资料法国生物梅里埃公司提供的商业派生菌株(Bioball)2010药典微生物培训资料低温冷冻保藏的标准储备菌株2010药典微生物培训资料低温蜡封保藏的标准储备菌株2010药典微生物培训资料我所制备的工作菌株2010药典微生物培训资料中国药典2010年版在方法的附录中对菌种的规定同2005年版在新增的“药品微生物实验室规范指导原则”中对菌种有了较为明确的规定允许使用标准菌株和商业派生菌株标准菌株应按保藏机构提供的说明进行复活标准储备菌株应进行纯度和特性确认标准储备菌株建议采用低温冷冻干燥、液氮贮存或超低温冷冻保藏的方法标准储备菌株可用于制备每月或每周一次转种的工作菌株冷冻菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用工作菌株不可替代标准菌株,商业派生菌株仅可用作工作菌株2010药典微生物培训资料菌种鉴定简单的讲可以采用目前比较成熟的商品化鉴定技术,如API鉴定条基本程序为:对疑似菌种进行纯培养进行染色镜检根据染色情况,并结合显色培养基等鉴定的初步信息,选择合适的鉴定条根据操作说明书,得到各生化反应的鉴定结果,通过查阅检索表,得到菌种鉴定的初步结果也可以采用半自动或全自动的微生物鉴定系统2010药典微生物培训资料菌种的管理菌种的采购菌种的复苏菌种的传代菌种的保藏菌种的使
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