第五章蛋白质ppt课件.pptxVIP

第五章蛋白质;5.1蛋白质的化学组成;存在自然界中的氨基酸有300余种，但组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种，且均属L-氨基酸（甘氨酸除外）。;;氨基酸的结构通式;氨基酸的分类;;氨基酸的化学性质;茚三酮反应

茚三酮在弱酸性溶液中与α-氨基酸共热，氨基酸被氧化成醛、CO2和NH3，最后茚三酮与反应产物──氨和还原茚三酮发生作用，生成蓝紫色化合物。

两个亚氨基酸──脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应形成黄色化合物。;;

5.3蛋白质的结构;一级结构二级结构三级结构四级结构;定义——1969年，国际纯化学与应用化学委员会（IUPAC）规定：

蛋白质的一级结构指蛋白质多肽连中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。

主要的化学键

肽键，有些蛋白质还包括二硫键;一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。;二、蛋白质的二级结构;蛋白质二级结构的主要形式;多肽链中的各个肽平面围绕同一轴旋转，形成螺旋结构，螺旋一周，沿轴上升的距离即螺距为0.54nm,含3.6个氨基酸残基；两个氨基酸之间的距离为0.15nm;

每个aa残基沿轴旋转100度.

肽链内形成氢键，氢键的取向几乎与轴平行，每个氨基酸残基的C=O氧与其后第四个氨基酸残基的N-H氢形成氢键。

绝大多数天然蛋白质中的?-螺旋几乎都是右手螺旋。

?-螺旋都是由L-型氨基酸构成的（Gly除外）。;;2.?-折叠（?-pleatedsheet）;?-折叠;?-折叠结构几乎所有肽键都参与链间氢键的形成，氢键与链的长轴接近垂直。

?-折叠有两种类型：

一种为平行式，即所有肽链的N-端都在同一边。

另一种为反平行式，即相邻两条肽链的方向相反;3.?-转角和无规卷曲;无规则卷曲示意图;１）超二级结构

在蛋白质分子中，由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成有规则的、在空间上能辨认的二级结构组合体。几种类型的超二级结构：αα；ββ；βαβ；βββ．

★超二级结构

（在结构层次上高于二级结构，但没有聚集成具有功能的结构域）;;纤维蛋白分子的结构域;;结构域1;三、蛋白质的三级结构;维持蛋白质三级结构的作用力;;β-折叠;2、三级结构的特征：

?含多种二级结构单元；

?有明显的折叠层次；

?是紧密的球状或椭球状实体；

?分子表面有一空穴(活性部位)；

?疏水侧链埋藏在分子内部，

?亲水侧链暴露在分子表面。

实例：肌红蛋白;;肌红蛋白;肌红蛋白(Mb);抹香鲸肌红蛋白（Myoglobin）的三级结构;四、蛋白质的四级结构;2.维持蛋白质四级结构的主要作用力;血红蛋白四级结构;化学键;血红蛋白的四级结构;蛋白质结构与功能的关系;一级结构是空间构象的基础;蛋白质一级结构与功能的关系;2.蛋白质一级结构的变异与分子病

分子病—指蛋白质分子中由于AA排列顺序与正常蛋白质不同而发生的一种遗传病(基因突变造成的)。

镰刀形贫血病：

病因：血红蛋白AA顺序的细微变化;正常红细胞;（一）肌红蛋白与血红蛋白的结构;一、两性解离性质及等电点

二、蛋白质胶体性质

三、蛋白质的沉淀

四、蛋白质的变性与复性

五、蛋白质的紫外吸收特性

六、蛋白质呈色反应;（一）蛋白质的两性电离;(二)蛋白质的胶体性质;;蛋白质胶体性质的应用;（三）蛋白质的变性、沉淀和凝固;造成变性的因素

如加热、乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等。;蛋白质沉淀;可逆沉淀;不可逆沉淀;盐析

在蛋白质的水溶液中，加入大量高浓度的强电解质盐如硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等，可破坏蛋质分子表面的水化层，中和它们的电荷，因而使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析。

而低浓度的盐溶液加入蛋白质溶液中，会导致蛋白质的溶解度增加，该现象称为盐溶。

盐析的机理：

破坏蛋白质的水化膜，中和表面的净电荷。

盐析法是最常用的蛋白质沉淀方法，该方法不会使蛋白质产生变性。;弱酸或弱碱沉淀法(等电点沉淀）

用弱酸或弱碱调节蛋白质溶液的pH处于等电点处，使蛋白质沉淀。

弱酸或弱碱沉淀法机理：

破坏蛋白质表面净电荷。;?有机溶剂沉淀法：

在蛋白质溶液中，加入能与水互溶的有机溶剂如乙醇、丙酮等，蛋白质产生沉淀。

有机溶剂沉淀法的机理：

破坏蛋白质的水化膜。

注意：有机溶液沉淀蛋白质通常在低温条件下进行，否则有机溶剂与水互溶产生的溶解热会使蛋白质产生变性。;重金属盐沉淀(条件：pH稍大于pI为宜)

当pH稍大于pI时，蛋白质颗粒带负电荷这样就容易与重金属离子结合成不溶性盐而沉淀。

重金属沉淀法的机理：

重金属盐加