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不飞则已，一飞冲天；不鸣则已，一鸣惊人。——《韩非子》

薄层层析（TLC）

——APC药片的剖析

实

验

报

告

不飞则已，一飞冲天；不鸣则已，一鸣惊人。——《韩非子》

色谱法的一些基本知识

1.色谱法的基本原理

色谱法是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不

同，让混合物的溶液流经该物质，经过反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分

开。固定不动的物质称为固定相，固定相可以是固体吸附剂，也可以是液体（吸附

在支持剂上）。

根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换

色谱、排阻色谱等；按操作条件可分为薄层色谱、柱色谱、气相色谱和高压液相色

谱等。流动相的极性小于固定相极性时为正相色谱，而流动相的极性大于固定相时

为反相色谱。

2.薄层色谱的原理与应用

波层色谱简称TLC，是一种固—液吸附色谱的形式，与柱色谱的原理和分离过

程相似，吸附剂的性质和洗脱剂的相对洗脱能力，在柱色谱中适用的同样适用于

TCL中。与柱色谱不同的是，TCL中的流动相沿着薄板上的吸附剂向上移动，而

柱色谱中的流动相则沿着吸附剂向下移动。

TLC的最大优点是：简易，快速，灵敏，高效，范围广（定性—定量，

0.01ug~500mg）。

TLC常应用于有机物的鉴定和分离，如通过与已知结构的化合物相比较，可鉴

定有机混合物的组成；在有机化学反应中可以用于对反应进行跟踪；在柱色谱分离

中，经常用其来确定分离条件和监控分离的过程。TCL不仅可以分离少量样品（几

微克），而且也可以分离较大量的样品（可达500毫克），特别适用于挥发性较低，

或在高温下易发生变化而不能用气相色谱进行分离的化合物。

在TLC中所用的吸附剂颗粒比柱色谱中用的要小得多，一般为260目以上。

当颗粒太大时，表面积小，吸附量少，样品随展开剂移动速度快，斑点扩散较大，

分离效果不好；当颗粒太小时，样品随展开剂移动速度慢，斑点不集中，效果也不

好。

薄层色谱所用的硅胶有多种：硅胶H不含粘合剂；硅胶G含粘合剂（煅石膏）；

硅胶GF254含有粘合剂和荧光剂，可在波长254nm紫外光下发出荧光；硅胶HF254

只含荧光剂。同样氧化铝也可分为氧化铝G、氧化铝GF254及氧化铝HF254。氧

化铝的极性比硅胶大，易用于分离极性小的化合物。

3.几个常用知识

1）.硬板∕软板：加粘合剂的薄板为硬板，不加粘合剂的薄板为软板。

2）.样品溶剂要求：溶解性好，沸点尽量低。

3）.展开剂的洗脱能力与其极性成正相关：石油醚﹤环己烷…苯﹤乙酸乙酯…

﹤甲醇﹤水﹤乙醇。

4）.板活性要与其含水量有关，可用标准样品进行实验测得。

5）.常用显色方法有：碘熏法、特性反应、UV灯等。

6）.比移值R=（样品组分最高浓度中心距原点距离）∕（展开剂前沿距原点

f

距离）影响R的因素有粒度、厚度、均匀度、活性、展开剂极性及杂质含量、

f