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山东师范大学博士学位论文
目录
摘要I
AbstractV
第一章文献综述1
1.1研究背景1
1.1.1土壤盐渍化1
1.1.2盐胁迫与盐生植物1
1.1.3二色补血草盐腺的研究进展2
1.1.4拟南芥表皮毛的发育机制研究5
1.1.5盐腺和表皮毛在进化上具有同源性7
1.1.6bHLH型转录因子在植物发育及抗性中的研究进展7
1.2论文选题的目的及意义9
第二章二色补血草bHLH基因家族的分析和LbbHLH28的筛选、克隆、基础分析10
2.1植物材料与试剂、仪器10
2.1.1二色补血草、拟南芥和洋葱的培养10
2.1.2试剂与仪器10
2.2实验方法11
2.2.1二色补血草中bHLH转录因子的筛选与鉴定11
2.2.2二色补血草中bHLH基因家族分析11
2.2.3LbbHLH28的克隆、表达载体的构建、LbbHLH28回补AtGL3的突变体13
2.2.4LbbHLH28的生物信息学分析16
2.2.5亚细胞定位分析17
2.2.6LbbHLH28表达模式的鉴定19
2.2.7原位杂交20
山东师范大学博士学位论文
2.2.8LbbHLH28启动子的全长克隆、元件分析及时空表达分析21
2.2.9pCAMBIA1301-pLbbHLH28-GUS载体的构建22
2.2.10启动子瞬时转化二色补血草并完成GUS染色22
2.2.11在拟南芥中进行组织化学定位分析23
2.2.12数据分析23
2.3实验结果23
2.3.1二色补血草中bHLH转录因子的筛选与鉴定23
2.3.2二色补血草bHLH基因家族的分析24
2.3.3LbbHLH28的筛选及LbbHLH28无法回补拟南芥GL3表皮毛缺失的突变体26
2.3.4LbbHLH28的生物信息学分析30
2.3.5LbbHLH28亚细胞定位在细胞核中32
2.3.6LbbHLH28的表达模式分析33
2.3.7原位杂交检测LbbHLH28在盐腺中表达34
2.3.8LbbHLH28启动子的全长克隆、元件分析及时空表达分析34
2.3.9LbbHLH28启动子在二色补血草的盐腺中表达36
2.4讨论37
第三章LbbHLH28在二色补血草盐腺发育、泌盐及抗盐过程中的功能研究41
3.1植物材料与试剂41
3.1.1二色补血草的培养41
3.1.2试剂和仪器41
3.2实验方法41
3.2.1敲除载体、过表达载体和基因沉默载体的构建41
3.2.2二色补血草LbbHLH28过表株系、敲除株系的获得、鉴定及表型观察43
3.2.3二色补血草LbbHLH28过表株系、敲除株系的盐分泌能力的测定45
山东师范大学博士学位论文
3.2.4LbbHLH28过表株系、敲除株系的抗盐生理指标测定45
3.2.5LbbHLH28VIGS46
的沉默株系的获得、鉴定及表型观察
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