中药显微鉴别技术讲义.ppt

制片的预处理——软化软化方法可采用放在吸湿器中闷润，或在水中浸软或煮软。经软化处理的材料，检查软化是否合适，可用刀片切割材料，若较容易切下薄片，则表示软化适宜。有些根、根茎、茎及木类药材，质地较坚实，可将削平的切面浸水中片刻，待表面润湿时取出，直接切片也能切成较完整的薄片。过于柔软的样品，可将其浸入70%~95%乙醇中，约20分钟后可变硬些，再切片。药材预处理时，应注意不能影响要观察的显微鉴别特征。如要观察菊糖、粘液等在软化、切片、装片等过程中，均不可与水接触，以免溶解消失；要观察挥发油、树脂等，则不可与高浓度乙醇或其它有机溶媒接触。如：茯苓淀粉粒菊糖制片的预处理——禁忌7.3.1.2切片在检验工作中，此法最常用，操作简便，迅速，制成的切片保持其细胞内含物的固有形态，便于进行各种显微化学反应观察一手持刀片，另一手拇指和食指夹持样品，中指托着样品的底部，使样品略高出食、拇二指；肘关节应固定，使样品的切面保持水平，刀口向内并使刀刃自前向后切削，即可得薄切片。操作时，材料的切面和刀刃须经常加水或50%乙醇保持湿润，防止切片粘在刀片上。切好的切片用毛笔蘸水轻轻从刀片上推入盛有水或50％乙醇的培养皿中。1)徒手切片法切片2)滑走切片机切片此法不需要较高的技巧，只要了解掌握操作方法，短时间内即可学会并切出较薄的切片，适用于切质地坚实、形状较大的药材样品，柔软的样品经冷冻处理亦可切得较薄的切片。切片前：01应检查切片机是否稳固，并调试刀具。将切片刀夹持在夹刀器上夹紧，调整刀的角度(约0。~15。)；调整厚度调节器至所需厚度。把制备好的样品用两块软木夹住或直接放在切片机的材料固定器上夹紧夹正，使样品露出软木块或固定器上端0.5cm，调整好样品高度，使刀刃靠近样品的切面且平行并略高于刀刃约0.5~1mm。02切片时用右手握夹刀器柄，往操作者方向迅速拉动，切下的切片附着于刀的表面上，用毛笔蘸水把切片取下放于盛水的培养皿中。将刀推回原处，转动厚度推进器，用毛笔蘸水润湿材料切面及刀刃，再拉刀柄，往返推拉，可得到许多厚度均匀完整的切片。若切片不成功，应检查切片刀是否太钝，则应磨刀或换锋锐的切片刀，若切得太薄而破碎，则逐渐增加厚度至能切得完整的薄片为度。注意：夹持在材料固定器上的样品切面接近于固定器上端时，必须注意防止切片刀刃碰撞固定器而损毁切片刀。装片选取薄而平整的切片置载玻片上，根据所要观察的内容要求，滴加适宜的试液1~2滴，盖好盖玻片，即可在显微镜下观察。为防止较大的切片弯卷，可选取理想的切片，用两张载玻片夹住，浸于水中放置4小时使材料压平，放入95%乙醇中固定，甘油装片观察。透化01在载玻片上放有切片处滴加1~2滴水合氯醛试液，置载玻片于酒精灯上方微微加热，至边缘起小泡即停止加热，可继续补充试液再加热，以不烧干为度，直至切片透化完全为止。02注意：加热温度不能过高，以防水合氯醛试液沸腾，使组织内带入气泡；加热时应将载玻片不断移动，以免受热不匀而炸裂。透化后放冷，加甘油乙醇试液l~2滴后加封盖片，贴上标签。冬日室温较低时，透化后不待放冷即滴加甘油乙醇液，以防水合氯醛结晶析出而妨碍观察。水合氯醛试液能使已收缩的细胞膨胀，便于清楚地观察组织构造；可溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油等，对草酸钙结晶无作用，为观察草酸钙结晶的良好试剂。如需观察菊糖等一些多糖物质则加水合氯醛试液不加热。主要用于粉末状的药材及药材粉末制成的成方制剂的观察。1药材粉末制备取干燥药材，磨或锉成细粉（通常应过80目以上药筛），装瓶，贴上标签。制备粉末时，注意取样的代表性。例如：根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位，并全部磨粉，过4号筛，混合均匀，不得丢弃渣头。干燥时，一般温度不能超过60℃，避免淀粉粒糊化，有碍观察。2粉末制片粉末制片用解剖针挑取样品粉末少许，置载玻片的中央，加适宜的试液1滴，用针搅匀(如为酸或碱时应用细玻棒代替针)，待液体渗入粉末后，用左手食指与拇指夹持盖玻片的边缘，使其左侧与药液层左侧接触，再用右手持小镊子或解剖针托住盖玻片的右侧，轻轻下放，则液体逐渐扩延充满盖玻片下方。如液体未充满盖玻片，应从空隙相对边缘滴加液体，以防产生气泡；若液体过多，用滤纸片吸去溢出的液体，最后在载玻片的左端贴上标签或书写上标记。7.3.3显微化学分析丁香切片滴加3%氢氧化钠的氯化钠饱和液，油室内有针状丁香酚钠结晶析出；北柴胡横切片加无水乙醇-浓硫酸1：1液，木栓层、栓内层和皮层显黄绿色至蓝绿色。7.3.4微量升华法利用药材所含成分有升华现象，置显微镜下观察结晶形状、色泽。如大黄，可见菱状针状或羽状结晶。1可直接取出粉末（内容物为颗粒状的应研细）装片，或透化装片。32散剂、胶囊剂