人教版教学课件高二生物(基因工程的基本操作程序).pptVIP

使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。01使目的基因能够表达和发挥作用。022、基因表达载体的构建目的：二、基因表达载体的构建—核心什么是转化？目的基因导入动物细胞常用的方法是什么？基本操作程序是怎样的？目的基因导入植物细胞常用的方法是什么？具体过程是怎样的？目的基因导入大肠杆菌的方法是怎样的？钙离子有什么作用？三、目的基因导入受体细胞转化目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。0102三、目的基因导入受体细胞三、目的基因导入受体细胞目的基因导入植物细胞农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法易感染双子叶植物和祼子植物。具有趋化性。Ti质粒上的T-DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上常用的方法:农杆菌的特点:目的基因导入植物细胞农杆菌转化法的导入过程:构建基因表达载体转入导入农杆菌植物细胞稳定维持和表达三、目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定01目的基因的获取02基因表达载体的构建03将目的基因导入受体细胞04基因工程的基本操作程序的步骤：STEP01STEP02什么是目的基因？获取目的基因的方法有哪些？其操作过程分别是怎样的？阅读与思考主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的因子。11、目的基因概念：从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因化学方法直接人工合成22、目的基因获取方法：一、目的基因的获取从基因文库中获取目的基因基因文库基因组文库将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。（如cDNA文库）基因文库：部分基因文库基因文库的构建过程基因组文库限制酶供体细胞的全部DNA大量DNA片段拼接到载体上导入受体细胞扩增基因文库的构建过程mRNA单链DNA双链DNA逆转录cDNA文库依据目的基因的有关信息。从基因文库中获取目的基因如何从基因文库中找到所需要的基因？如：根据基因的核苷酸序列基因在染色体上的位置基因的转录产物mRNA基因翻译产物蛋白质等特性。01PCR的全称：02聚合酶链式反应03PCR的原理：04DNA复制05PCR技术扩增目的基因的前提条件：06要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。利用PCR技术扩增目的基因利用PCR技术扩增目的基因模板原料引物酶控制温度——目的基因DNA——四种脱氧核苷酸——如单链DNA分子片段——耐热的DNA聚合酶——PCR仪自动调控PCR的条件：利用PCR技术扩增目的基因复性(55-60℃)延伸(70-75℃)变性(90-95℃)PCR的过程：条件：基因较小，核苷酸序列已知。用化学方法直接人工合成二、基因表达载体的构建—核心用切目的基因相同的限制性内切酶切割质粒二、基因表达载体的构建—核心目的基因基因表达载体的构建—核心二、基因表达载体的构建—核心基因表达载体的组成目的基因启动子:终止子:标记基因等一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的首端。一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的尾端。是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。使转录在所需要的地方停止。启动子的作用：基因表达载体的构建—核心标记基因作用：是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来，如青霉素基因。终止子作用：*