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血清碱性磷酸酶ALP测定.pdf

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血清碱性磷酸酶ALP测定

1检验目的

指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果

的准确。

2实验原理

本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础,所

采用的反应原理与反应式如下。

ALP

对-硝基苯磷酸盐+H2O对硝基酚+

磷酸

在上述反应中,对-硝基苯酚的生成速率与样本中碱性

磷酸酶的活力成正比。通过在405nm处监测吸光度的上升

速率,即可测得样本中碱性磷酸酶的活性。

3标本采集与处理:

3.1病人准备:无特殊要求。

3.2标本类型:标本最好是无溶血的血清。

3.3血清分离:应在收集后两小时内分离出来。避免使用含

EDTA或草酸盐的血浆。

3.4标本存放:2~3天内的活性损失:15~25℃保存:10%;

标本稳定性:4~8℃保存稳定7天;-20℃保存至少可稳定2

个月标本。如果分析延迟8小时以上,最好把血清冷藏。冷

冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。

3.5标本运输:常温条件下运输

3.6标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。

4实验材料:

4.1试剂:上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒(沪

食药监械(准)字2014第2400166号YZB/沪1546-40-2014)

4.1.1试剂组成

试剂1乙酸3.0mmol/硫酸锌1.5mmol/L

(R1):镁L

HEDTA3.0mmol/AMP缓冲液420mmol/L

L

试剂2对-硝基81.5mmolAMP缓冲液420mmol/L

(R2):苯磷酸盐/L

5.0mmol/L

HEDTA

4.1.2试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件

下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。试剂启用

后,在2~10℃避光的条件下可稳定14天。

4.1.4变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能

继续使用。

4.1.5注意事项:试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激

作用或毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触,即用大

量清水冲洗。请勿吞服。

4.2校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的

ALP校准品对自动分析仪进行校准。

4.3质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5仪器

AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪,西门子

ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪

6操作步骤

6.1样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位

置。

6.2试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积

等确认无误后方可进行测定。

6.3项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗

氏P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏

P800生化分析仪,西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝

TBA-120生化分析仪操作规程。

7质量控制

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为

未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘

制质控图,判断是否在控。

8计算方法

以ALP复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围

内,仪器直接报告可靠的检测结果,以U/L报告。

9参考值范围

成年人

男性

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