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微生物的分别与培育
1.驾驭微生物培育中的无菌操作技术
(1)3种常用的消毒方法:煮沸消毒法、巴氏消毒法及化学药剂消毒法。
(2)3种常用的灭菌方法:灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具;干热灭菌——主要针对玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌——主要针对培育基等。
2.理清微生物培育的4种基本操作
(1)培育基的制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)倒平板操作:待培育基冷却至50_℃左右时,在酒精灯火焰旁边倒平板。
(3)平板划线操作:通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。留意划线的方法如图所示。
(4)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的菌落。
3.驾驭微生物分别与计数的两个实例
(1)土壤中分解尿素的细菌的分别与计数
①筛选菌株:利用选择培育基筛选菌株。
②过程:土壤取样→样品稀释→微生物的培育与视察→细菌的计数。
③测定微生物数量的常用方法:活菌计数法和显微镜干脆计数法。
④鉴定方法:用含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培育基培育细菌→指示剂变红,则说明该菌能分解尿素。
(2)分解纤维素的微生物的分别
①原理
②流程:土壤取样→选择培育基→梯度稀释→涂布平板→选择菌落。
a.分别能分解纤维素的微生物时,有时须要进行选择培育,选择培育的目的是增大选择对象在样液中的浓度,以确保用刚果红染色法鉴别时的确能得到所需菌种。
b.培育基:以纤维素为唯一碳源的选择培育基。
c.筛选方法:刚果红染色法,即通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。
1.(2024·全国卷Ⅱ)在生产、生活和科研实践中,常常通过消毒和灭菌来避开杂菌的污染。回答下列问题:
(1)在试验室中,玻璃和金属材质的试验器具________(填“可以”或“不行以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采纳巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是____________________________。
(3)密闭空间内的空气可采纳紫外线照耀消毒,其缘由是紫外线能________________。在照耀前,适量喷洒________,可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在运用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的缘由是_________________。
解析:(1)在试验室中,能耐高温的、须要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属材质的试验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比,其优点表现为在达到消毒目的的同时,养分物质损失较少。(3)紫外线照耀能消毒的缘由是其能够破坏微生物细胞中的DNA分子。在利用紫外线照耀前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可强化消毒效果。(4)自来水通常采纳氯气进行消毒。(5)采纳高压蒸汽灭菌时,若压力达到设定要求,而温度未达到相应要求,最可能的缘由是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。
答案:(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,养分物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽
2.(2024·全国卷Ⅰ)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培育基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
Ⅰ号培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。
Ⅱ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。
Ⅲ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。
回答下列问题。
(1)在Ⅰ号培育基中,为微生物供应氮源的是________。Ⅱ、Ⅲ号培育基中为微生物供应碳源的有机物是________。
(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培育基中,培育一段时间后,不能降解X的细菌比例会____________,其缘由是____________。
(3)Ⅱ号培育基加入琼脂后可以制成固体培育基,若要以该固体培育基培育目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采纳的方法是____________。
(4)假设从Ⅲ号培育基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长供应________和________。
解析:(1)牛肉膏蛋白胨培育基中,牛肉膏、蛋白胨为微生物供应了氮源,而Ⅱ号、Ⅲ号培育基中除X外的其他物质均不含碳,所以能为微生物供应碳源的有
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