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生物化学实验期末蚕豆病设计性实验报告.pptxVIP

生物化学实验期末蚕豆病设计性实验报告.pptx

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生物化学实验期末蚕豆病设计性实验报告

案例分析

案例:

患儿,男性,3岁,因面色苍白伴血尿1天入院。1天前食用新鲜蚕豆后,今日出现恶心、呕吐、排尿呈酱油样(发

生溶血性贫血)色,面色苍白。据家长反映,患者的姐姐也曾发生过类似情况。

体格检查:体温38℃,脉搏150次/分,呼吸40次/分,血压80/60mmHg,呼吸急促,神清,萎靡,面色苍白,皮肤

及巩c膜黄染,体型较同龄人瘦小。心、肺未及异常,肝、脾未触及,双肾区无叩击痛,神经系统检查未及异常。实验

室检查:红细胞1.98×1012/L,血红蛋白53g/L,血清总胆红素85.5µmol/L,结合胆红素13.7µmol/L,未结合胆红素

71.8µmol/L,尿蛋白(++),潜血(+),尿胆红素(-),尿胆素原(+),尿液镜下未见红细胞。

实验室检查项目患儿检查值正常值

1212

红细胞1.98×10/L(6.0-7.0)×10/L↓

血红蛋白53g/L(170-200)g/L↓

血清总胆红素85.5µmol/L(3.4-17.1)µmol/L↑

结合胆红素13.7µmol/L0~3.42μmol/L↑

未结合胆红素71.8µmol/L0~13.68μmol/L↑

尿蛋白(++)

潜血(+)

尿胆红素(-)

尿胆素原(+)

红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症[1]

发病前曾食用蚕豆皮肤及巩膜黄染

其姐亦类似病史黄疸

排尿呈酱油样

蚕豆病Bp:80/60mmHg

溶血性贫血

T:38℃P:150bpm

体温升高B:40bpm

呼吸急促

设计实验

实验设计

特异性不高

高铁血红蛋白还原试验

G6PD筛选试验

G6PD荧光斑点试验

国际血液学标准化委员会

(ICSH)推荐

红细胞G6PD活性测定

G6PD确诊试验

G6PD基因分析

实验原理

G6PD荧光斑点试验[2]

G6PD

G6P6PGA

340nm紫外线

NADPNADPH荧光

实验原理:葡萄糖-6-磷酸(G6P)在G6PD作用下形成6-

磷酸葡萄糖(6PGA),同时使NADP转变为NADPH,后者在

340nm波长紫外线照射下产生荧光。所以将含有G6P和

NADP等的混合试剂与血混匀,通过观察滤纸上有荧光出现

时间可判断G6PD活性。

G6PD荧光斑点试验

试剂:10mmol/LG6P钠盐、7.5mmol/LNADP、

1g/dL皂素、250mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4),

蒸馏水

仪器:长波紫外灯、滤纸、水浴箱

实验流程

G6PD荧光斑点试验

1反应液的配制:10mmol/lG6P钠盐0.1ml、7.5mmol/l

NADP0.1ml、1g/dl皂素0.2ml、250mmol/l磷酸盐缓冲

液(pH7.

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