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唾液淀粉酶最适PH值测定

摘要：酶是具有高效催化能力的生物大分子物质，底物浓度相同时，酶的催化活

性主要受温度、pH等因素影响。温度一定时，酶活力最高时的pH值为该酶在该

温度的最适pH。在不同pH值下。通过测定淀粉酶水解底物的程度，测定唾液淀

粉酶的最适pH值。在不同pH条件下，淀粉被唾液淀粉酶水解，与碘液反应呈现

颜色反应，通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小。可知底物的

反应程度，从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。

关键词：唾液淀粉酶最适pH吸光值

前言：酶是由生物体内活细胞产生的一种生物催化剂，细胞新陈代谢包括的所

有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶催化化学反应的能力称为酶活性。

酶的化学本质是蛋白质，它具有两性电解质的性质，在一定溶液中可以发生解离

作用。酶无论在生活中还是在医学领域都具研究意义，酶的各种特性被广泛应用

于各个领域。影响酶反应活力的因素很多，主要包括pH、温度、酶浓度、金属

离子浓度、抑制剂等。酶在水溶液环境中的解离状态和行为，都受到H+的影响，

酶活性中心功能基团解离状态将直接影响到酶的活化以及酶与底物的亲和力，其

会随着溶液pH的改变而改变。所以，溶液pH对酶催化反应的速度有明显的影响。

在某-pH值时，酶活性达到最大，这一数值称为酶的最适pH。不同的酶的最适

pH不相同。淀粉经唾液中的淀粉酶水解，生成糊精和麦芽糖，在底物过量的条

件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物，其颜色的深浅与

空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生

的蓝色在660nm处的吸光度值来表示淀粉酶的活性。在温度、酶浓度相同的情

况下，酶活力在最适pH的情况下达到最大。

一、实验步骤：

1.不同pH缓冲液的配制

配制各个pH的缓冲液10ml，选择pH值从5.8-7.6，间隔0.2。

表1磷酸缓冲液配制表用量(mL)

0.2mol/L0.2mol/L

编号pH蒸馏水

Na2HPO4(ml)NaH2PO4(ml)

16.00.624.385.00

26.20.934.075.00

36.41.333.675.00

46.61.883.125.00

56.82.452.555.00

67.03.051.955.00

77.23.601.405.00

2.唾液的获取

先漱口1-2次，然后含一大口水约1min，期间做咀嚼运动，然后收集至干净的

烧杯中。

3.淀粉用量的确定

如表2，设置实验组与空白对照组。

表2实验组和空白对照组设置表用量(mL)

实验组12345空白对照

7.0pH缓冲液0.90.90.90.90.90.9

2.5淀粉0.10.20.30.40.5

唾液(稀释5倍)0.1