兽药残留检测技术激素类.pptVIP

我国从20世纪90年代起,也陆续开始对用于促生长目的的同化激素禁止使用,并已开展了相关的监测工作。目前,同化激素对环境的污染已引起了社会各界的普遍关注。欧盟(原欧洲经济共同体)从1988年起,禁止所有同化激素用于动物的促生长目的,并制定了严格的监测措施。长期摄入同化激素，即使含量甚微，也会导致机体代谢紊乱、发育异常,且多数激素类物质具有潜在的致癌作用。但是,在利益驱动下,在世界范围内,同化激素仍在被大量滥用。就残留的危害和引起的争议而言,同化激素与抗生素并列为最重要的兽药残留。同化激素的危害目前,在局部地区已开始出现人类生存危机现象,如发达国家约有20%的家庭没有子女,而睾丸癌的患者明显增加。05对男性的危害：表现为睾丸萎缩、胸部扩大、早秃、肝肾功能障碍或肝脏肿瘤。03进人人体和动物体后,对其生殖功能产生严重的影响,甚至可能造成某些物种的绝种。01对女性的危害：可引起女性的不孕、早产、流产、月经不调或女性男性化(肌肉增生、毛发增多)等现象。04通过食物链进行富集,在人体首先引起内分泌失调,危害生殖系统,易出现生殖器病变。02雄性激素及其同化激素的危害激素污染对人类以外的其他动物影响更为显著,如鱼、鸟和哺乳动物的大量死亡,雌雄异变,生育和发育紊乱,免疫力下降等现象,可能均与此有关。1980年左右,美国一造纸厂废水排出口下游的雌性鱼雄性化,且雄性化后的鱼与原先正常雌性鱼进行交尾,原来正常雄性鱼出现超雄化,并表现为攻击性交尾行动。在日本,发现有雌海螺长有雄海螺的生殖器。对其他动物的危害雌性激素造成的环境污染,同样可能造成某些物种的绝种。通过食物链产生的富集作用,可引起人体的内分泌失调,对男性的危害：使男性精子数量下降或出现女性化、性早熟、抑制骨骼发育等。对女性的危害：可引起女性性早熟、生殖器官畸形和癌变,这一效应在其女性后代中表现更显著。对人类后代的危害：这些激素透过胎盘,可引起用药者子宫内膜及女性后代的阴道宫颈癌变和男性后代的精子发育不良、生殖器畸形。雌性激素的危害雌性激素的污染对人类之外的其他动物,同样有着严重的影响。美国出现的雄性美洲狮雌性化、加拿大的海豚在生殖周期出现卵巢异常、南极企鹅产下无精卵以及其他一些连体、畸形动物的较高比例出现,可能均与环境激素污染有关。对其他动物的危害皮质激素的样品处理01同化激素的样品处理02二、样品处理STEP5STEP4STEP3STEP2STEP1液体样品(奶、血液、尿液)提取前需要脱脂肪,通常在4℃、7000g离心,除去浮在上层的脂肪。组织样品(肌肉、肝、肾)先要用切碎机或匀浆器进行组织破碎。水或醋酸盐缓冲液常用于样品的稀释。肝脏或尿样中的皮质激素结合物较多,因此先用葡糖苷酸酶/硫酸酯酶水解。由于酶解反应较慢,为保证水解完全,可在较高的温度下来加速水解或延长孵育时间。用超临界萃取法提取时,先要将组织样品匀浆,再进行冷冻干燥。皮质激素样品预处理（一）皮质激素01在一定的pH值条件下,一般用有机溶剂对样品提取和除蛋白。02例如,氯仿提取牛奶中的氢化可的松;03二氯甲烷-正己烷(4+1)提取牛奶中游离的氢化可的松和21-醋酸酯;04乙酸乙酯提取动物组织中的氢化波尼松、氟强的松龙、氟羟强的松龙、倍他米松,牛奶中的甲基强的松龙，牛奶中的氢化波尼松和地塞米松;05含0.1mol/L氢氧化钠的乙酸乙酯提取牛组织中的地塞米松;2、提取皮质激素126543甲醇提取牛肉组织中的5种皮质激素;乙腈提取牛肝脏中的5种人工合成的皮质激素和牛组织中的地塞米松;乙醚提取牛粪中9种合成的皮质激素;二氯甲烷提取动物脂肪中的氟强的松龙;丙酮提取动物肝脏(肾脏和肌肉中的氟强的松龙。此外,牛奶和尿样可以直接用水或醋酸盐缓冲液稀释并提取。123456有机溶剂法提取粗提取液中含大量的内源性干扰物质,为了消除或降低干扰并浓缩分析物,样液需要净化处理。净化方法包括液-液萃取、固相萃取、免疫亲和色谱及柱切换技术等。液-液萃取可以简单的一次溶剂萃取,也可以多次溶剂萃取。萃取次数的多少,很大程度上取决于色谱的分离效率和选择性。色谱的分离度和选择性愈高,样品的提取和净化步骤可以简略一些,还可以提高分析效率。3、净化04030102液-液萃取可以除去生物样品中大部分杂质和蛋白质。例如,氢化波尼松、氟强的松龙、氟羟强的松龙和倍他米松的乙酸乙酯提取液,依次用稀酸溶液和稀碱溶液洗涤,可以除去碱性和酸性的水溶性杂质。地塞米松的乙酸乙酯提取液,可以用氢氧化钠溶液洗涤,以除去酚类雌激素。甲基强的松龙的初提液蒸发至干后,用乙腈溶解,加入正已烷提取,正已烷提取液再用饱和的硫酸钠水溶液