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编写教师:郑洪副教授编写日期:2006年9月化学实验教学示范中心编写教师:郑洪副教授编写日期:2006年9月化学实验教学示范中心《仪器分析实验》实验10分子荧光分析法MolecularFluorimetryForshort:M-F厦门大学精品课程仪器分析(含实验)一、分子荧光分析法简介(对光的吸收)1.1荧光的产生发生激发态反应分子内的激发和衰变过程激发态能量的跃迁与转化的形式和速率:A1,A2吸收:10-15sVR振动松弛:?10-12sic内转化:?10-11sisc系间窜越:10-6~10-2sF荧光:10-9~10-6sP磷光:10-6~100s激发光谱发射光谱1.2荧光光谱
任何荧光化合物,都具有两种特征的光谱:激发光谱和发射光谱。组成、结构与衍化信息☆物质的化学结构☆环境与介质条件☆与其它溶质的相互作用☆反应动力学1.3荧光定量F=K﹒I0﹒φf﹒CI0:光源强度;φf:荧光量子产率;C:荧光体浓度)1)影响相对荧光强度的因素有哪些?2)试比较荧光法与紫外-可见分光光度法的分析性能。?问题:(☆注意:在一定浓度范围内适用)1.4荧光仪的基本构造?问题:荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置上有什么不同?为什么?定性分析:φf;λex;λem;峰形等定量检测:F=K﹒I0﹒φf﹒C其它(略)高端生化研究:分子相互作用研究;代谢动力学跟踪;显微成像(物理迁移与化学衍化的原位“显迹”)常规分析应用:1.5分子荧光分析法的应用简介二、维生素B6注射液中维生素B6含量的
荧光法测定2.1实验原理★在近中性的水溶液中有较强的荧光发射:(323nm/392nm附近)★在碱性介质中不稳定★易发生光降解VB6的化学结构试液配制VB6的荧光光谱的绘制未知液的配制标准工作曲线的制作2.2实验流程编写教师:郑洪副教授编写日期:2006年9月化学实验教学示范中心编写教师:郑洪副教授编写日期:2006年9月化学实验教学示范中心*
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