酶工程复习要点.docVIP

名词解释：

酶工程：酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程。固定化酶：固定在载体上并在一定的空间范围内进行的催化反响的酶固定化活细胞：固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞。固定化细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢

固定化原生质体：固定在载体上，在一定的空间范围内进行新陈代谢的原生质体。

膜别离技术：借助一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、形状、性质的颗粒或分子进行别离的技术。酶促破碎法：通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的催化作用，使细胞外层结构受到破坏，而到达细胞破碎的方法。结晶：是指物质以晶体的状态从蒸汽或溶液中析出的过程。 萃取别离：利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法。酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。大分子结合修饰：采用水溶性大分子与酶的侧链基团共价结合，使酶分子的空间构象发生改变，从而改变酶的催化特性的方法。肽链有限水解修饰：肽链的水解在限定的肽键上进行，称为肽链有限水解。利用肽链的有限水解，其分子质量减少，既可以在根本保持酶活力的同时使酶的抗原性降低或消失，又可以使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性和功能的方法，称为肽链有限水解修饰。氨基酸置换修饰：将酶分子肽链上的某一个氨基酸置换成另一个氨基酸，从而改变酶的催化特性的修饰方法。原生质体融合育种：就是把两个亲本的细胞分别去掉细胞壁，获得原生质体，将两亲本的原生质体在高渗条件下混合，由聚乙二醇〔PEG〕作为助融剂，使它们互相凝集，发生细胞质融合，接着两亲本基因组由接触到交换，从而实现遗传重组的方法进行育种基因工程育种：改变细胞调节基因，使菌种由诱导型变为组成型。增加结构基因的拷贝数，增加细胞专一性酶的生产.组成酶：细胞固有的酶类。诱导酶：是细胞为适应外来底物或其结构类似物而临时合成的一类酶。分解代谢物阻遏：指细胞内同时有两种分解底物〔碳源或氮源〕存在时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶合成的现象反响阻遏：酶催化反响的产物或代谢途径的末端产物使该酶的生物合成受到阻遏的现象反响抑制：是最终产物抑制作用，在合成过程中，有些微生物合成途径的终点产物对该途径酶的活性调节，所引起的抑制作用。发酵动力学：研究发酵过程中细胞生长速率、产物生成速率、基质消耗速率以及环境因素对这些速率的影响的学科。细胞定向进化：是在细胞水平上进行定向进化的过程，以各种细胞为进化对象，目的是改进细胞的各种特征，主要包括微生物细胞的定向进化、动物细胞的定向进化、植物细胞的定向进化等。

酶反响器：用于酶进行催化反响的容器及其附属设备。固定化酶膜反响器：由膜状或板状固定化酶或固定化微生物组装的反响器。

1.何谓酶工程，试述其主要内容和任务。

答：酶的生产、改性与应用的技术过程称为酶工程。

酶的生产：微生物发酵产酶、动植物培养产酶、酶的提取和别离纯化.酶的改性：酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶的定向进化酶的应用：通过酶的催化作用获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。酶工程的内容：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与别离纯化，酶分子的修饰，酶、细胞、原生质体固定化，酶非水相催化，酶定向进化，酶反响器和酶的应用等。

酶工程的任务：经过预先设计，通过人工操作获得人们所需的酶，并通过各种方法使酶的催化特性得以改进，充分发挥其催化功能。

3、影响酶催化作用的主要因素。

一、底物浓度的影响二、酶浓度的影响三、温度的影响四、pH的影响

五、抑制剂的影响六、激活剂的影响

4、酶活力单位和酶比活力的概念。

在实验室规定的条件下，每分钟催化lumol底物变化所需要的酶量为一个酶活力国际单位(用“IU”表示，简写为U)。

酶的比活力是指在特定的条件下，单位质量〔mg)蛋白质或RNA所具有的酶活单位数。

5、如何测定固定化酶的比活力？固定化酶常用的活力测定方法有哪些？

在固定化酶中，一般采用每克〔g)干固定化酶所具有的酶活力单位数表示。

固定化酶常用的活力测定方法：振荡测定法、酶柱测定法、连续测定法

1、提高酶的产量的措施。

〔一〕遗传控制〔一劳永逸〕

诱变育种

(1)使诱导型变为组成型——选育组成型突变株

(2)使阻遏型变为去阻遏型

基因工程育种

改变细胞调节基因，使菌种由诱导型变为组成型。

增加结构基因的拷贝数，增加细胞专一性酶的生产。

〔二〕条件控制

〔1〕添加诱导物〔2〕降低阻遏物浓度〔3〕添加外表活性剂〔4〕添加产酶促进剂

2、酶生物合成的模式及每种模式的特征。

1．同步合成型

特征：生物合成伴随着细胞的生长而开始；在细胞进入旺盛生长期时，酶大量合成；当细胞生长进入平衡期后，酶的合成随着停