2025年高考生物一轮复习必背知识清单—基因工程、生物技术的安全性问题（背诵版）.pdfVIP

2025年高考生物一轮复习必背知识清单—基因工程、生物技术的安全性问

题（背诵版）

第1节重组DNA技术的基本工具

[必备知识]

1．基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需

要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，

因此又叫作重组DNA技术。(P67)

2．1944年，艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可

以在同种生物的不同个体之间转移。(P68“科技探索之路”)

3．切割DNA分子的工具是限制性内切核酸酶，简称限制酶，这类酶主要是从原核生物中分离纯化出

来的。它们能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，产

生黏性末端或平末端两种形式的末端。(P71)

4．DNA连接酶主要有两类，一类是E.coliDNA连接酶，另一类是T4DNA连接酶。后者既可以“缝合”

双链DNA片段互补的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对较低。

(P72)

5．质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复

制能力的环状双链DNA分子。(P72)

6．载体必须具备的条件：(1)能在受体细胞中保存下来并能自我复制；(2)具有一个或多个限制酶切割位

点，以便与外源基因连接；(3)具有标记基因。(P72)

7．在基因工程中使用的载体除质粒外，还有噬菌体、动植物病毒等。它们的来源不同，在大小、结构、

复制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差别。(P73)

8．DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。DNA

在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在一定温度下，DNA遇二苯胺试

剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。(P74“探究·实践”)

[重要图解]

1．限制酶切割DNA分子产生两种不同末端的示意图(箭头表示酶的切割位置)(P71)

下图中的图1和图2分别表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图，从图示可以看出，EcoRⅠ

限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在G和A之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是CCCGGG，

切割位点在G和C之间。图1说明，EcoRⅠ发挥作用是在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别

切开，所以产生的是黏性末端，图2说明SmaⅠ发挥作用是在它识别序列的中心轴线处将DNA的两条链分

别切开，所以产生的是平末端。（P71“图3-3”改编）

2．大肠杆菌及质粒结构模式图(P72)

[易错提醒]

错点1：误认为目的基因的插入位点是“随机”的

精析：目的基因的插入位点不是随机的，基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入

启动子与终止子之间的部位，若目的基因插入启动子内部，启动子将失去原功能。

错点2：误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶”

精析：

(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶，以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制

酶切割后形成的黏性末端相同时，在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。

(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”，可用不同的限制酶分别处理目的基因

和载体，使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。

第2节基因工程的基本操作程序

[必备知识]

1．培育转基因抗虫棉主要需要四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因

导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。(P76)

2．PCR是聚合酶链式反应的缩写。它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复

制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。(P77)

3．PCR反应过程可以分为变性、复性和延伸三步。(P78)

4．PCR反应过程可以在PCR扩增仪(PCR仪)中自动完成，完成以后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定

PCR的产物。(P79)

5．构建基因表达载体的目的