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抗凝系统与纤溶系统检查.ppt

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凝血象:活化部分凝血活酶时间(APTT)85秒(对照48秒),凝血酶原时间(PT)25秒(对照14秒),凝血酶时间(TT)21秒(对照12秒),纤维蛋白原(FIB)0。98g/L。血浆鱼精蛋白副凝试验(3P)阳性(+++)、乙醇胶试验阳性(++)、外周血红细胞碎片>6%、D-二聚体试验(胶乳法)阳性(++)。项目

抗凝系统与纤溶系统检查

模块1抗凝系统的检验1.血管内皮的抗凝作用;2.纤维蛋白的吸附、血流的稀释及单核巨噬细胞的吞噬作用;3.生理性抗凝物质(1)丝氨酸蛋白酶抑制物抗凝血酶III:由肝细胞和血管内皮细胞分泌的一种糖蛋白。抗凝血酶III可以与FIXa、FXa、FXIa、FXIIa和凝血酶分子中的丝氨酸残基结合,使凝血因子和凝血酶活性中心失活。肝素辅助因子。蛋白质C系统组织因子途径抑制物肝素:由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生的一种粘多糖。抗凝机制:可与抗凝血酶III结合,增强抗凝血酶III的抗凝作用。还可刺激血管内皮细胞释放组织因子抑制物和其他抗凝物质来抑制凝血过程。静脉采血(同前)凝血酶时间测定(TT)【实验原理】凝血酶可使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。在血浆中加入“标准化”的凝血酶后,血浆凝固所需时间称为凝血酶时间。【试剂】011.0.1mol/L草酸钠溶液。02凝血酶溶液用生理盐水调至使正常血浆在16-18s凝固为标准。03【操作方法】取抗凝血浆0.1ml于小试管内,置37℃水浴中,加凝血酶溶液0.1ml,同时开动秒表,记录凝固时间。重复2-3次,求平均值。【质量控制】01血浆在室温下放置不能超过3h,EDTA盐和肝素抗凝血不宜做本试验。TT终点以出现混浊的初期凝固为准。02【临床意义】正常为16-18s,超过正常对照3s为异常。TT延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在,如SLE、肝病、肾病等;低(无)纤维蛋白原血症、FDP增多、DIC等。模块2纤溶系统的检验

01.纤溶意义:02.维持血液于流体状态溶解血栓使血流通畅1、静脉采血(同前)

2、血浆纤维蛋白原检测(Fg)【实验原理】以凝血酶作用于受检者血浆中的纤维蛋白原,使其发生凝固,测定凝固所需时间。血浆纤维蛋白原的量与凝固时间程负相关,将检测结果与标准曲线对比可得出纤维蛋白原含量。输入标题【试剂】输入标题输入标题输入标题蒸馏水和血浆稀释液2凝血酶溶液参比血浆143【操作方法】取1:10稀释的抗凝血浆0.2ml于小试管内,置37℃水浴中预热2min,加凝血酶溶液0.1ml,同时开动秒表,记录凝固时间。重复2-3次,求平均值。与参比血浆检测结果制成的标准曲线或回归方程比较,得出检测结果。【质量控制】血浆在室温下放置不能超过3h,EDTA盐和肝素抗凝血不宜做本试验。参比血浆应与待测血浆一起检测,保证结果的可靠性。【临床意义】正常为2-4g/L。纤维蛋白原增高除生理情况下的应激反应、妊娠后期外,主要出现在感染、灼伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊高征、败血症及某些恶性肿瘤及急性肾炎尿毒症等。纤维蛋白原减少则见于DIC、原发性纤溶亢进症、重症肝炎、肝硬化和溶栓治疗时。【实验原理】胶乳凝集法:D-二聚体是教练纤维蛋白降解产物之一,为继发性纤溶的特有代谢产物。被检测血浆中加入标记D-二聚体单抗的胶乳颗粒悬液,如果血浆中D-二聚体含量时,便与胶乳颗粒上的抗体结合,胶乳颗粒则发生凝集。根据被检测血浆的稀释度可计算血浆。输入标题【试剂】输入标题输入标题输入标题微量加样器、离心机等2D-二聚体检测胶乳凝集试剂盒【器材】143【操作方法】01制备被检者枸橼酸那抗凝的新鲜血浆。02取胶乳试剂20μl,至于胶乳反应板的圆圈内,加入被检者新鲜血浆20μl,迅速搅匀,轻摇3-5min。03在较强的光线下观察结果,出现明显均匀的凝集颗粒者为阳性(D-二聚体含量大于0.5mg/L),无凝集颗粒者为阴性(D-二聚体含量小于0.5mg/L)04040301【质量控制】胶乳反应板应保持清洁干燥。实验所用试剂盒应置于2-8oC保存,勿冻结,使用前从冰箱拿出,室温平衡。测定温度高于20oC或低温环境应延长1-2min观察结果。0201【临床意义】正常为小于0.4mg/L。03深静脉血栓形成、心肌梗死、重症肝炎、肺栓塞等血栓性疾病D-二聚体增高。02DIC时,D-二聚体检测阳性或增高,为诊断D

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