微生物的基因突变.pptVIP

转座因子转座导致基因改变*Tn基因序列被破坏插入genemRNA无活性的肽活性肽01RNA基因组的突变03突变速率是DNA基因组的1000倍以上02许多病毒：RNA基因组04除RNA复制酶的校正外，无过多修复机制突变的回复和抑制1同位回复突变2回复突变基因内抑制3异位回复突变4（抑制突变）基因间抑制5置换抑制6移码抑制7信息抑制8互作抑制9基因内抑制置换抑制第一位置突变导致一氨基酸替换第二位置突变改变另一氨基酸，回复了蛋白质的构像、稳定性和活性如色氨酸合成酶TyrA蛋白12logo210位突变174位突变移码抑制*在移码突变的附近增加（删除）碱基，恢复蛋白质阅读框二）基因间抑制1.信息抑制由于翻译信息的改变，而将正常氨基酸插入到突变位置，恢复蛋白功能如tRNA基因突变3’-GAU-5’GUAtRNATry3’-CAU-5’mRNA2.互作抑制多亚基蛋白质的活性取决于：各亚基的一级结构；各亚基之间相互作用形成的高级结构蛋白质相互作用表型基因型野生型突变型互作抑制突变A+B+A-B+A-B-第四节诱发突变的分子机制*诱变剂（mutagen）化学～物理～生物～*化学诱变剂碱基类似物如5-BrU，类似T5-BrU:A5-BrU:G结果：在复制中引入突变，AT→GC原因：通过酮式和烯纯式转变而诱发突变碱基修饰剂*烷化剂：如甲基磺酸乙酯脱氨基诱变剂：如亚硝酸其他：如羟胺修饰碱基，强力诱变剂在复制中和静止中都可引入突变插入诱变剂吖啶橙类：溴化乙锭：片状分子，插入到两碱基对之间，引起移码突变Oligonucleotidemismatchmutagenesis体外定点诱变（invitrosite-specificmutagenesis）诱变和致癌作用诱变剂的作用：Mutagenesisandcarcinogenesis诱变剂的检测：Amestest通过鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）组氨酸缺陷型（his-）的回复突变来确定Amestest物理诱变剂非离子辐射：如紫外线辐射离子辐射：如X-射线，?-射线突变体的获得还要有合适的出发株，适当的处理和诱变，然后再分离和检测每个基因组复制周期中错误发生的频率10-7～10-11/bp10-4～10-8/gene（1000bp/gene）1～ncell/culture（108cell/ml）新合成链环出，亲本链跳格，也叫“滑移”诺贝尔奖级的生化学家艾姆斯(BruceAmes)带来最新的喜讯：癌症是可以预防的。

艾姆斯发明的测癌方式（AmesTest）辐射：高能量电磁波转座子标签技术（transposontagging）用已知转座子对基因进行诱变，根据抗性标记筛选突变体，进一步分离不同表型的突变体，然后根据转座子的已知序列通过分子杂交或PCR分离插入突变的基因为避免光复活修复的产生，紫外诱变后的处理和细菌培养，应避免可见光的照射，一般在红光下操作。错配修复后DNA发生错配的概率大大降低10-5（DNA合成中的错配）×10-2（DNA聚合酶3‘→5’外切核酸酶校正后）×10-3（错配修复后）即通常所说的暗修复UvrABC修复。原核生物与紫外线损伤修复有关的一些基因，称为UvrA、UvrB、UvrC。其产物，UvrA，UvrB是辨认及结合DNA损伤部位的蛋白质，UvrC有切除损伤部位相邻12个核苷的酸的作用，可能还需要有解螺旋酶的协助，才能把损伤部位除去。然后由DNA聚合酶Ⅰ补充空隙，连接酶连接，完成修复。原母链中的损伤部位仍需切除修复才能去除子代细胞中只有一个细胞是带有损伤DNA的*第十章微生物的基因突变

（MicrobialMutation）*内容突变的概念突变的类型和分离方法*自发突变的分子机制*＃诱发突变的分子机制*＃DNA损伤的修复#*第一节突变的概念突变和变异01突变（mutation）：可以通过复制而遗传的DNA结构的任何改变。02变异（variation）：由基因控制的、对环境具有适应性的表型差异。03突变体（mutant）：携带某一突变基因，并表现出相应表型的细胞或个体及其后代。04基因突变的特点*随机性稀有性可逆性有突变热点可诱发性1研究基因突变的意义2认识基因的存在和功能3研究复制、表