ZmGT1和ZmHB13调控玉米雌雄性别决定与育种应用研究.pdf

摘要

玉米是世界范围内重要的农作物。花序是植物重要的生殖器官，玉米花序的发育

决定了玉米籽粒的形成及发育，最终影响产量。玉米是典型的雌雄同株异花授粉植物，

因此，玉米花序的正常性别决定（雌性小花和雄性小花的形成）是保障玉米高产和稳

产的前提。前人报道显示ZmGT1能够在玉米雄穗心皮原基高量表达，并调控雄穗小

花的心皮发育。在本研究中，我们发现玉米HD-ZipI家族基因突变体Zmgt1/Zmhb13

双突变体出现雄穗小花雌性化的现象。我们对该突变体进行了系统的表型、细胞学观

察，结合分子生物学研究证实了ZmGT1和ZmHB13参与茉莉酸介导的玉米花序性别

决定过程，并探讨了其调控网络在玉米育种中的潜在应用价值。本文的主要研究结果

如下：

1、通过CRISPR/Cas9体系创制ZmGT1及其同源基因缺失突变体，并对相关突变

体表型分析，结果发现Zmgt1/Zmhb13双突变体植株矮小、分蘖数增多，雄穗小花上

有明显的花丝。通过体视显微镜进一步观察发现，花丝的出现是由于突变体雄穗小花

的心皮原基未发生退化。相比之下，Zmhb13单突变体并没有雄穗雌化现象发生，而

Zmgt1单突变体中雄穗却存在花丝生长的现象，但数量明显少于Zmgt1/Zmhb13双突

变体。

2、通过转录组测序差异基因GO富集分析发现，Zmgt1/Zmhb13双突变体中茉莉

酸通路相关基因被大量富集，其中，茉莉酸合成基因ZmOPR7和ZmOPR8等表达量

有明显的下调，这一结果表明ZmGT1和ZmHB13可能参与茉莉酸通路的调控。

3、茉莉酸回补实验结果表明，连续体外施加1mM茉莉酸能够明显改善

Zmgt1/Zmhb13双突变体的雄穗雌化现象，进一步表明Zmgt1/Zmhb13双突变体的雄穗

雌化现象可能是由于内源茉莉酸合成受阻所导致。

4、通过酵母单杂实验发现，ZmGT1和ZmHB13蛋白能够结合ZmOPR7的启动

子。此外，利用双荧光素酶实验发现，ZmGT1和ZmHB13能够激活ZmOPR7的表达。

以上这些结果暗示ZmGT1和ZmHB13可以直接激活ZmOPR7的表达。

5、以ZmGT1为诱饵筛选玉米cDNA酵母文库筛选得到33个候选互作蛋白。进

一步酵母双杂交验证发现，ZmGT1能够与茉莉酸信号途径的关键抑制因子ZmJAZ26

发生相互作用。结合前人在拟南芥中研究发现，AtJAZs能够通过束缚转录激活因子

AtMYC2而抑制茉莉酸合成基因AtLOX2的表达。这些实验结果暗示我们ZmGT1可

I

能在翻译后水平参与到茉莉酸合成的调控。

综合以上结果，本研究认为ZmGT1和ZmHB13可能在不同水平上对雄穗小花的

茉莉酸生物合成进行调控，即转录水平上直接结合并促进茉莉酸合成基因ZmOPR7的

表达，蛋白水平上直接结合潜在的茉莉酸信号途径抑制因子ZmJAZ26，进而影响到雄

穗小花心皮发育，最终导致雄穗雌化的表型。本研究结果不仅为揭示玉米雌雄花序性

别决定的遗传和分子基础提供了新颖的见解，也可为玉米改良雄穗雌化表型提供种质

资源和理论指导。

关键词：玉米；ZmGT1；ZmHB13；性别决定；茉莉酸

II

英文缩略词

缩略词英文名称中文名称

bpBasePair碱基对

cDNAComplementaryDNA互补DNA

cmCentimeter厘米

CTABHexadecylTrimethylAmmoniumBromide十六烷基三甲基溴化铵

DEPCDieyhylPyrocarbo