Adenosine_ADORA2A对猪胎盘血管生成的作用机制研究.pdf

摘要

随着我国现代高产母猪产仔数的增加，宫内发育迟缓（Intrauterinegrowth

retardation,IUGR）仔猪的发生比例也在逐年升高。胎盘血管生成不足是造成IUGR发

生的重要原因。腺苷（Adenosine）具有调控血管生成的作用，且参与多种妊娠并发症

的调控，但其对IUGR猪的影响尚不清晰，对猪胎盘血管生成的作用还未见报道。为

此，本研究首先比较了不同妊娠期不同体重胎猪胎盘的血管生成与腺苷代谢差异；其

次，探究了饮水补充腺苷对胎盘发育及IUGR发生的影响；随后，采用基因表达调控

技术，探究腺苷及其受体对猪血管内皮细胞成管的作用及其机制；最后，以妊娠母猪

为对象，研究了日粮补充腺苷对猪胎盘血管生成和IUGR发生的影响。主要试验结果

如下：

试验一：胎盘血管生成与腺苷受体表达模式差异分析。收集不同妊娠期（G33、

G50和G90天）的高（High,H）、低（Low,L）体重胎猪对应胎盘进行转录组与代谢

组分析，并比较了正常（Normal）与IUGR胎儿胎盘的血管生成与腺苷受体的差异。

结果显示：（1）随着妊娠进展，胎盘血管生成与嘌呤代谢活性持续上调，在G50和

G90天时H组显著高于L组，腺苷4种受体中仅腺苷A2a受体（AdenosineA2areceptor,

ADORA2A）表达量随妊娠进展持续上调且H组高于L组；（2）Normal组血管生成

显著高于IUGR组，且4种腺苷受体中仅A2a的蛋白与mRNA水平均显示为Normal

组高于IUGR组。结果表明：IUGR胎儿胎盘血管生成不足，ADORA2A表达量下调。

试验二：外源腺苷对鼠胎盘血管生成和IUGR胎儿发生的影响。试验采用2x2双

因素变量分为对照（Normal）、IUGR模型（IUGR）、对照+腺苷（Normal+Ado）和

IUGR+腺苷（IUGR+Ado）4个组。其中IUGR模型在妊娠期饲喂6%低蛋白日粮诱

导IUGR的发生，在妊娠18.5天处死收集胎盘。结果显示：（1）IUGR组较Normal

组，仔鼠初生重、胎盘血管生成显著降低，IUGR率显著升高；（2）IUGR+Ado组逆

转了（1）中IUGR组发生的现象；（3）IUGR+Ado组改善了IUGR组胎盘中腺苷代

谢情况，且在4种腺苷受体中仅增加了A2a的蛋白与mRNA水平。结果表明：外源

腺苷可激活ADORA2A表达，逆转低蛋白日粮诱导的胎盘血管生成不足和IUGR发生。

试验三：Adenosine/ADORA2A对猪血管内皮细胞成管的作用机制。以猪髋动脉

内皮细胞（Porcineiliacarteryendothelialcells,PIECs）为离体模型，裸鼠体内成管为

在体模型，表达调控Adenosine/ADORA2A信号研究其对PIECs血管生成的作用及机

I

制。结果表明：（1）腺苷可显著促进PIECs血管生成，且4种受体中仅提高了A2a

的表达；（2）沉默A2a受体后逆转了腺苷的促成管作用，且极显著降低了细胞Ang

mRNA水平（-90%），并显著降低了p-Stat3和p-Akt的水平；（3）沉默Ang不影响

p-Stat3和p-Akt的水平但依然可逆转腺苷的促成管作用；（4）抑制Stat3和Akt信号

通路逆转了腺苷的促成管作用且降低了Ang的表达；（5）腺苷可促进裸鼠体内成管，

沉默A2a后可逆转此现象，过表达Ang后又可恢复此现象。以上结果说明：腺苷通

过激活ADORA2A，上调Stat3和Akt信号通路，进而增加Ang的表达，最终促进PIECs

的血管生成。

试验四：妊娠日粮补充腺苷对母猪胎盘血管生成与IUGR发生的影响。选取妊娠

60天的初产二元杂母猪80头，按体重和背膘一致原则随机分为2组：对照组（Con）

与0.1%腺苷组（Ado）。记录产仔性能并收集正常与IUGR胎猪对应胎盘。结果发现：

（1）Ado组424头仔猪较Con组441头仔猪的初生重（1.38kgvs1.49kg）、仔猪活力

与胎盘效率显著升高，IUGR