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脐带间充质干细胞制剂放行技术规范

1范围

本文件规定了脐带间充质干细胞制剂放行的要求、检验方法、检验规则和包装、贮存、运输。本文件适用于脐带间充质干细胞制剂(以下简称干细胞制剂)的放行、检验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T39729细胞纯度测定通用要求流式细胞测定法

GB/T39730细胞计数通用要求流式细胞测定法WS273梅毒诊断

WS293艾滋病和艾滋病病毒感染诊断《中华人民共和国药典》

《全国临床检验操作规程》

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

脐带间充质干细胞umbilicalcordmesenchymalstemcell

从人类脐带结缔组织中分离得到的，具有多向分化潜力，非造血干细胞的成体干细胞。[来源：《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》，有修改]

3.2

干细胞制剂stemcellpreparation

用于治疗疾病或改善健康状况的、以不同类型干细胞为主要成分、符合相应质量及安全标准，且具有明确生物学效应的细胞制剂。

[来源：《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》]

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

CD：细胞膜表面分化抗原簇（ClusterofDifferentiation）HBV：乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus）

HCV：丙型肝炎病毒（HepatitisCVirus）

HIV：人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus）

HLA-DR：人类白细胞抗原DR等位基因（HumanLeukocyteAntigenDR）TP：梅毒螺旋体（TreponemaPallidum）

5要求

5.1干细胞质量属性

5.1.1基本生物学属性

干细胞基本生物学属性要求见表1。

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表1干细胞基本生物学属性

项目

要求

细胞形态

细胞贴壁生长，亮度高，伸展呈长梭形，形态均一

细胞计数/（个/kg）

≥1×106

细胞活率/（%）

95

受体体重。

5.1.2微生物安全性

干细胞微生物安全性要求见表2。

表2干细胞微生物安全性

项目

要求

细菌

阴性

真菌

阴性

支原体

阴性

内毒素/（EU/mL）

≤0.5

病毒

（TP、HCV、HBV、HIV、新冠病毒）

阴性

5.1.3生物学有效性

干细胞生物学有效性要求见表3。

表3干细胞生物学有效性

项目

要求

细胞表型

干性标志物（CD73、CD90和CD105）

阳性率/（%）

95

分化标志物（CD14、CD19、CD34、CD45和HLA-DR）阳性率/（%）

＜2

三系分化能力

第十代的脐带间充质干细胞，在体外条件培养基诱导培养下，具备分化成脂肪、骨和软骨细胞的能力。

5.2干细胞制剂配制

干细胞制剂配制应符合附录A的规定。

6检验方法

6.1基本生物学属性

6.1.1细胞形态

贴壁培养条件下，使用倒置显微镜，在物镜10倍或20倍下观察。

6.1.2细胞计数

按照GB/T39730规定的方法检测。

6.1.3细胞活率

按照《全国临床检验操作规程》白细胞计数的方法检测。

6.2微生物安全性

6.2.1细菌

按照《中华人民共和国药典》四部，通则1101无菌检测法检测。

3

6.2.2真菌

按照《中华人民共和国药典》四部，通则1101无菌检测法检测。

6.2.3支原体

按照《中华人民共和国药典》四部，通则3301支原体检查法检测。

6.2.4内毒素

按照《中华人民共和国药典》四部，通则1143细菌内毒素检查法检测。

6.2.5病毒

6.2.5.1TP

按照WS273附录A.3规定的方法检测。6.2.5.2HCV

按照《全国临床检验操作规程》核酸法检测。6.2.5.3HBV

按照《全国临床检验操作规程》核酸法检测。

6.2.5.4HIV

按照WS293附录B.3规定的方法检测。

6.2.5.5新冠病毒

参照《全国临床检验操作规程》病毒核酸法检测。

6.3生物学有效性

6.3.1细胞表型

参照GB/T39729规定的方法检测。

6.3.2三系分化能力

参照附录B的方法检测。

7检验规则

7.1放行检验

7.1.1产品出厂前，应由制备机构的质量检验部门按本标