2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体（解析版）.docx

第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体

1．利用乳腺生物反应器进行生物制药前需要筛选出雌性动物的胚胎进行移植，H—Y单克隆抗体能与雄性胚胎中的特异性H—Y抗原发生阳性反应，从而达到筛选的目的。下列有关H—Y单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是（????）

A．经H—Y抗原免疫的B淋巴细胞可直接用于生产H—Y单克隆抗体

B．将B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后，需要进行严格的筛选

C．通过动物细胞融合获得的杂交瘤细胞可以直接进行大规模培养

D．若利用培养液体外培养杂交瘤细胞，需要定期添加新的培养液

【答案】B

【分析】经抗原处理的B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。

【详解】A、经H—Y抗原免疫的B淋巴细胞不能直接用于生产H—Y单克隆抗体，原因是B淋巴细胞不能无限增殖，A错误；

B、将B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后，可能得到多种融合细胞，需要用特定的培养基进行筛选，以获得所需的杂交瘤细胞，B正确；

C、不是所有的杂交瘤细胞都能高效分泌H—Y单克隆抗体，因此还需要进行专一抗体阳性检测，检验出阳性细胞后才可以进行大规模培养，C错误；

D、细胞生长增殖过程中会产生大量的代谢产物，代谢产物的大量积累会对细胞自身造成伤害，因此需要定期更换培养液，D错误。

故选B。

2．科研工作者常常将单克隆抗体与细胞毒素类药物偶联起来，制成的“生物导弹”，来定向治疗癌症并降低药物的副作用，其过程如图所示。下列有关叙述不正确的是（????）

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A．经①形成的细胞都能无限增殖并产生相应抗体

B．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞

C．未与单克隆抗体偶联的细胞毒素等药物没有选择杀伤癌细胞的功能

D．抗癌细胞的单克隆抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性

【答案】A

【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、经①诱导融合过程形成的细胞不都能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，A错误；

B、②过程需要筛选出既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞并克隆单个杂交瘤细胞，获得单克隆抗体，B正确；

C、用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，其中，构成“弹头”的化学药物、细胞毒素等物质没有选择杀伤癌细胞的功能，而单克隆抗体能将这种杀伤功能定位，C正确；

D、过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。

故选A。

3．肿瘤细胞表面的PD-L1蛋白能够与T细胞上的PD-1蛋白结合，使肿瘤细胞逃避免疫系统的杀伤。目前，运用抗PD-1或抗PD-L1的单克隆抗体将PD-1/PD-L1信号通路阻断成为一种新的治疗手段，下列有关抗PD-L1单克隆抗体的制备叙述正确的是（????）

A．需将小鼠的T细胞与人的肿瘤细胞融合

B．可选择灭活的病毒或PEG诱导细胞融合

C．杂交细胞均具有产生抗体和大量增殖的特点

D．制备的单克隆抗体可以直接用于临床治疗

【答案】B

【分析】1、动物细胞融合指用自然或人工方法使两个或多个不同的动物细胞融合成一个细胞的过程的技术。诱导动物细胞融合的方法有PEG（聚乙二醇）融合法，电融合法、离心，灭活病毒诱导法等。

2、把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合，实际操作中有多种融合情况，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，其中B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合所得到的杂交瘤细胞就可能大量增殖，产生足够数量的特定抗体。

【详解】A、单克隆抗体的制备需将小鼠的B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合，A错误；

B、动物细胞融合可选择灭活的病毒或PEG诱导细胞融合，B正确；

C、只有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才具有产生抗体和大量增殖的特点，C错误；

D、制备的单克隆抗体还需进行后续测试才能用于临床治疗，D错误。

故选B。

4．猪瘟病毒（CSFV）蛋白质外壳上的E2蛋白，对于病毒入侵细胞至关重要。研究人员利用E2蛋白来制备抗CSFV的单克隆抗体，过程如图所示。下列叙述错误的是（????）

A．细胞①可从注射E2蛋白的小鼠脾脏中获得

B．细胞③为既能无限增殖又能产生特异性抗体的细胞