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枳菊解郁汤对抑郁模型小鼠学习记忆及脑内c-fos表达的影响

一、实验材料与方法

(1)实验动物：选用健康成年雄性C57BL/6小鼠，体重20-22g，购自某省实验动物中心。所有动物在实验前适应性饲养1周，保持标准饮食和光照条件，确保实验前动物状态良好。

(2)抑郁模型建立：采用慢性unpredictablestressmodel(CUS)建立抑郁模型。将小鼠随机分为对照组、模型组和枳菊解郁汤组，每组10只。模型组小鼠进行慢性不可预测性应激处理，包括反复改变环境、昼夜颠倒、禁食禁水等。枳菊解郁汤组在建模的同时给予枳菊解郁汤灌胃，对照组给予等体积的生理盐水。连续处理7天后，采用行为学测试评估抑郁模型建立情况。

(3)学习记忆能力测试：采用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力。实验分为训练阶段和测试阶段。训练阶段，将小鼠放入水池中，在池底设置一平台，小鼠需要通过观察和记忆找到平台。测试阶段，分为逃避潜伏期测试和穿越平台测试，记录小鼠找到平台所需时间和穿越平台的次数。通过比较各组小鼠的学习记忆能力差异，评估枳菊解郁汤对抑郁模型小鼠学习记忆能力的影响。同时，采用Y迷宫实验检测小鼠的短期记忆和空间记忆能力，记录小鼠在Y迷宫中的错误选择次数和正确选择次数。

二、枳菊解郁汤对抑郁模型小鼠学习记忆能力的影响

(1)在Morris水迷宫实验中，与对照组相比，模型组小鼠的逃避潜伏期显著延长，穿越平台次数明显减少，表明模型组小鼠的学习记忆能力受到显著影响。枳菊解郁汤组小鼠的逃避潜伏期缩短，穿越平台次数增加，与模型组相比，枳菊解郁汤组小鼠的学习记忆能力有所改善。

(2)在Y迷宫实验中，模型组小鼠在短期记忆和空间记忆测试中的错误选择次数显著增加，正确选择次数减少，表明模型组小鼠的记忆能力受损。而枳菊解郁汤组小鼠的错误选择次数减少，正确选择次数增加，提示枳菊解郁汤可能对抑郁模型小鼠的记忆能力有积极影响。

(3)综合Morris水迷宫和Y迷宫实验结果，枳菊解郁汤能够显著改善抑郁模型小鼠的学习记忆能力，表现为逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加、错误选择次数减少以及正确选择次数增加，提示枳菊解郁汤可能通过调节小鼠的认知功能，发挥抗抑郁作用。

三、枳菊解郁汤对抑郁模型小鼠脑内c-fos表达的影响

(1)采用免疫组化方法检测小鼠脑内c-fos蛋白的表达情况。结果显示，与对照组相比，模型组小鼠海马区c-fos蛋白表达显著降低，提示抑郁模型小鼠海马区的神经可塑性可能受到影响。枳菊解郁汤组小鼠的海马区c-fos蛋白表达水平较模型组显著升高，表明枳菊解郁汤可能通过上调c-fos蛋白的表达，改善抑郁模型小鼠的认知功能。

(2)通过Westernblot实验进一步验证c-fos蛋白的表达水平。结果显示，模型组小鼠海马区c-fos蛋白的相对表达量低于对照组，而枳菊解郁汤组小鼠的c-fos蛋白表达量显著增加。这些结果表明，枳菊解郁汤可能通过增加海马区c-fos蛋白的表达，提高抑郁模型小鼠的认知能力。

(3)结合免疫组化和Westernblot的结果，枳菊解郁汤能够有效提高抑郁模型小鼠脑内c-fos蛋白的表达水平，这可能与枳菊解郁汤改善抑郁小鼠的认知功能有关。c-fos蛋白作为神经元活动的重要指标，其表达水平的升高可能反映了枳菊解郁汤对神经元活动的调节作用，从而有助于改善抑郁小鼠的认知功能障碍。