酶的功能及作用.ppt

非竞争性抑制的双倒数图形特征Michaelis-Menten的三个假设：反应体系处于稳态即[ES]不变→ES的生成量=ES的分解量推导的v为反应初速度→产物的生成量很少→k2的反应忽略不计。[S][E]→[S][ES][ES]生成速度：，[ES]分解速度：当酶反应体系处于恒态时：即：令：则：(1)经整理得：由于酶促反应速度由[ES]决定，即，所以(2)将（2）代入（1）得：(3)当[Et]=[ES]时，(4)所以将（4）代入（3），则：米氏方程的推导恒态法（三）KM的意义：Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L。即当ν=Vmax/2时，Km=[S]。Km值的大小可以近似反应酶与底物亲和力的大小。Km越小，酶与底物的亲和力越大。可用于判断反应级数：当[S]0.01Km时，反应为一级反应；当[S]100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应；当0.01Km[S]100Km时，为混合级反应。01Km是酶的特征性常数：只与酶的性质有关，与酶的浓度无关。02Km可用来判断酶的最适底物：如酶能催化几种不同的底物，对每种底物都有一个特定的Km值，其中Km值最小的称该酶的最适底物。双倒数作图法LINEWEAVER-BURK：Km和Vmax的测定：（五）双底物双产物反应A+B P+Q双底物双产物的反应按动力学机制可分为两大类:双底物双产物的反应序列反应（sequentialreactions）乒乓反应（pingpongreactions）有序序列反应（orderdreactions）随机序列反应（randomreactions）01有序序列反应（orderedreactions02写作orderedBiBi）写作RandomBiBi）02随机序列反应（randomreactions，0112乒乓反应（pingpongreactions，写作unipingpongorPingPongBiBi）12抑制剂对反应速度的影响01凡是能降低酶促反应速度，但不引起酶分子变性失活的物质统称为酶的抑制剂(inhibitor)。按照抑制剂的抑制作用，可将其分为不可逆抑制作用(irreversibleinhibition)和可逆抑制作用(reversibleinhibition)两大类。02不可逆抑制作用：抑制剂与酶分子的某些基团共价结合引起酶活性的抑制，且不能采用透析等简单方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。举例有机磷化合物??羟基酶解毒------解磷定(PAM)重金属离子及砷化合物??巯基酶解毒------二巯基丙醇(BAL)有机磷化合物对羟基酶的抑制路易士气失活的酶巯基酶失活的酶酸BAL巯基酶BAL与砷剂结合物01抑制剂以非共价键与酶分子可逆性结合造成酶活性的抑制，且可采用透析等简单方法去除抑制剂而使酶活性完全恢复的抑制作用就是可逆抑制作用。02可逆抑制作用包括竞争性、反竞争性、和非竞争性抑制几种类型。（二）可逆性抑制作用：竞争性抑制（competitiveinhibi-tion)：概念：抑制剂与底物竞争与酶的某一部位结合，从而干扰了酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，称为竞争性抑制作用。竞争性抑制竞争性抑制的速度方程与图形特征竞争性抑制的双倒数图形特征竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物；抑制剂同酶的结合部位与底物同酶的结合部位相同或不同；抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小；动力学参数：Km值增大，Vm值不变。（2）竞争性抑制的特点：*举例1.丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制琥珀酸琥珀酸脱氢酶FADFADH2延胡索酸磺胺药对细菌FH2合成酶的抑制反竞争性抑制：概念抑制剂不能与游离酶结合，但可与ES复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，此抑制作用称酶的反竞争性抑制。抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物结合，使ES的量下降。反竞争性抑制?反竞争性抑制的双倒数图形特征抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合；必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加；动力学参数：Km减小，Vm降低。反竞争性抑制剂的化学结构不一定与底