DB41T 1574-2018 芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.080G20

DB41

河南省地方标准

DB41/T1574—2018

芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定高效液相色谱法

2018-04-17发布2018-07-17实施

河南省质量技术监督局发布

DB41/T1574—2018

I

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省质量技术监督局提出。

本标准起草单位：河南省产品质量监督检验院。

本标准主要起草人：郭蕊、孙晓霞、丁国涛、侣丽莎、仵春、赵海波、鲍春铭。

DB41/T1574—2018

1

芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定方法。

本标准适用于以芝麻饼为原料，经微生物发酵、加工制成的芝麻饼肥中芝麻素和芝麻林素含量的测定。

本方法的检出限为：芝麻素0.02mg/100g；芝麻林素0.04mg/100g。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY525—2012有机肥料

3方法提要

试样中芝麻素、芝麻林素经乙醇溶液超声提取，以甲醇+水为流动相，在波长287nm处使用C18反相高效液相色谱柱进行分离，外标法定量。

4鉴别试验

本鉴别试验可与芝麻素（或芝麻林素）含量的测定同时进行。在相同的色谱条件下，试样溶液某一色谱峰的保留时间与标样溶液色谱图上芝麻素（或芝麻林素）色谱峰的保留时间，其相对差值在1.5%以内，即可确认试样中含有芝麻素或芝麻林素。

当以上方法对芝麻素（或芝麻林素）鉴别有疑问时，可采用其他有效方法进行鉴别。

5试剂和材料

芝麻素标样：已知质量分数≥98.0%；

芝麻林素标样：已知质量分数≥98.0%；甲醇：色谱纯；

乙醇：优级纯，8+2溶液；

标准储备液：称取0.0100g（精确至0.0001g）芝麻素标样于100mL容量瓶中，加入80mL乙醇溶液，超声5min，取出，冷却至室温，用乙醇溶液定容至刻度，摇匀。配制成100μg/mL芝麻素标准贮备液，于4℃避光保存。采用同样的方法，称取0.0100g（精确到0.0001g）芝麻林素标样，配制成100μg/mL芝麻林素标准贮备液，于4℃避光保存。

6仪器和设备

高效液相色谱仪：具紫外可变波长检测器或二极管阵列检测器；

DB41/T1574—2018

2

色谱数据处理机或色谱工作站；

色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm（i.d.)，5μm，或柱效相当的色谱柱；进样器：20μL；

过滤器：滤膜孔径为0.45μm；涡旋混匀器；

超声波振荡器；离心机。

7标准曲线的制备

7.1标准溶液的制备

准确量取1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL、20.0mL、40.0mL芝麻素和芝麻林素标准储备液于

100mL容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，摇匀。其质量浓度为1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的芝麻素、芝麻林素混合标准溶液。

7.2色谱操作条件

流动相：甲醇+水＝80+20，经滤膜过滤，并进行脱气；柱温：室温（温度波动应不大于2℃);

流速：1.0mL/min；检测波长：287nm；进样体积：5.0μL；

保留时间：芝麻素约6.0min，芝麻林素约7.2min。

以上操作参数是典型的，可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳分离效果（见图1）。

图1芝麻饼肥提取液高效液相色谱图

DB41/T1574—2018

3

7.3操作步骤

在上述色谱条件下，待仪器稳定后，对标准溶液进行分析。以芝麻素、芝麻林素标准溶液浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，得到线性方程。

按式（1）计算回归参数：

y=a●x+b………（1）

式中：

y

——色谱图上芝麻素或芝麻林素的峰面积值；

a

——回归曲线的斜率；

x

——标准溶液中芝麻素或芝麻林素的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL）；

b

——回归曲线的截距。

8测定

8.1试样提取液的制备

按NY525—2012中6.6规定