细胞周期与调控.ppt

12(cyclin-dependentkinase，CDK)CDK是一类重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，包括CDK1—7种。催化亚基CDK二、细胞周期素依赖激酶调节亚基cyclin。ATP的结合部位复合物三、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（CDKinhibitoryproteinCKIS）CKIS是CDK抑制蛋白，通过竞争性地抑制cyclin或cyclin—CDK复合物，导致cyclin生物学功能丧失；G1期CKIS有2个蛋白家族：INKs：p15、p16、p18、p19是CDK4和CDK6的特异性抑制物。CIP／KIPs：p21、P27、p57等，抑制各种cyclin-CDK复合物，阻止CDK激酶的激活，或阻止活化的CDK激酶活性。p16INK4又称多肿瘤抑制基因(multipletumorsuppressorMTSI)，是CDK4的特异性抑制物，可与cyclinD竞争与CDK4或CDK6的结合，抑制CDK4对细胞生长分裂的正向作用，参与抑制细胞周期G1／S的转化。p16在缺乏功能性Rb的细胞中水平上升，提示Rb可能抑制p16的表达，同时Rb刺激cyclinD的表达。1、P16p15INKB与p16一样属抑癌基因。2、p15INKBP27可能是最直接地影响G1/S期限制位点的调控。广泛抑制cyclin—CDK复合物。正常情况下P27在G0／G1时表达增高，进入S期后表达下降。人的p27cDNA全长594bp，编码198个氨基酸，是高度保守的蛋白分子。其N末端介导抑制CDK，约12-87氨基酸主序列与p21同源。3、P27p27表达水平受多种因素调控，如有丝分裂原、抗增殖信号因子、细胞因子、癌基因子及接触抑制等。TGF-β和接触抑制能共同调控转录p27和p15，其负调节信息的共同通路是抑制CDK和G1—cyclin功能，发挥CKI抑制作用。TGF-β对p27表达的影响是双相的，在大多数细胞中，TGF-β可诱导p27的表达，但是在正常垂体前部和垂体瘤细胞中，TGF-β可下调p27mRNA及蛋白的表达。PDGF、EGF等也可下调p27的表达。p27对细胞周期的调控主要依赖于其蛋白表达水平，而非基因突变。p27的表达下降或缺失会引起基因组不稳定，甚至导致肿瘤发生。p21p21基因位于染色体6p21．2，第17-71氨基酸含有cyclin结合抑制区。p21可能阻碍细胞进入S期；能抑制SAPK(stress-activatedproteinkinase)，参与细胞应激状态时的信号转导级联系统的调节。p27丝裂原刺激G0G1SG2MG1SG2MG0DEAB细胞受丝裂原刺激后合成cyclin的时序和相对浓度CyclinB的降解途径细胞周期素及与之对应的CDKs调控中各元素间的相互作用胞周期的调控可分为外源和内源性调控,外源性调控主要是细胞因子以及其它外界刺激引起；源性调控主要是通过Cyclin—CDK—CDI的网络调控来实现。图1.cyclin、CDK及CDKI相互关系各种细胞周期蛋白随特定细胞时相而出现。G1早期，cyclinD表达并与CDK2或CDK4结合，成为始动细胞周期的启动子；G1晚期、进入S早期后cyclinE表达，并与CDK2结合，推动细胞进入S期；进入S期后，cyclinA表达，cyclinD、cyclinE降解；S晚期、G2早期，cyclIinA、cyclinB表达，并与cdc2(CDK1)结合，促进细胞进入M期。cyclinA和CDK2相结合可以调节S期进入G2期；cyclinBl—2可与CDKl结合并在G2／M转化期间活性达到最高峰；与cyclinC匹配的CDK及其酶解底物尚不清楚；cyclinH与cyclinC有较高的同源序列，可以和CDK7装配成全酶对细胞周期各阶段行使调节作用。细胞转录因子（E2F）在许多DNA合成基因和细胞生长调控基因的启动子中均含有E2F的位点，E2F可以直接活化这些基因，启动DNA合成使细胞进入S期。在E2F基因活化转录功能区内有一段18个氨基酸的序列可与Rb结合，Rb通过与E2F功能区的结合遮盖其功能区，抑制其活性转录功能，抑制DNA合成。E1A的介入，释放出更多的游离E2F，影响着一些与转化表型有关的特定基因表达。Rb基因Rb基因位于人类染色体13q14，其转录产物Rb蛋白是主要的转录信号连接物，在细胞周期中起制动器功能。它能与转录因子E2F结合并阻止相应基因转录表达，从而抑制细胞生长。cyclinD是Rb调节细胞周期的基