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实验报告集锦[15篇]

试验报告1

一、试验目的

测定酸模、香蒲、毛茛、青岛藨草、绿萝5种湿地植物在污水净化过程中根内酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和脲酶活力。

二、试验方法

1.磷酸酶测定方法

(1)根中酸性磷酸酶的测定;(2)根中碱性磷酸酶;(3)水中酸性磷酸酶;

(4)水中碱性磷酸酶。

2.脲酶测定方法

(1)(1)1)根中脲酶活性：奈氏试剂显色法;(2)水中脲酶活性：同根中脲酶活性测定方法，但酶液是直接取0.5mL的污水。

三、试验材料及试剂

1.试验材料

试验室条件下用自制污水培育的5种湿地植物(自移植至试验室新生出的根系要达到肯定量);

2.试验中使用的污水是自配污水，配方如下：水1L、淀粉0.067g、葡萄糖0.05g、

蛋白胨0.033g、牛肉膏0.017g、Na2CO3·10H2O(无水0.02g)0.067g、NaHCO30.02g、Na3PO40.017g、尿素0.022g、(NH4)2SO40.028g;

3.试验试剂

磷酸酶、脲酶测定过程中需要试剂：

①0.2mol/LpH7.8磷酸缓冲液

②0.2mol·L-1pH5.8醋酸钠缓冲液

称取醋酸钠16.406g，容量瓶定容至1L，用0.3mol/L的醋酸溶液调整pH=5.8(用pH计校正)。

③3NNaOH溶液

④0.05mol·L-1pH8.7Tris–盐酸缓冲液缓冲液

称取12.114克Tris，容量瓶定容至1L，取50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与10.3毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升，再用pH计校正。

⑤奈氏试剂：称取7g碘化钾溶于10ml水中，将10g碘化汞溶于其中。在100ml容量瓶中配置氢氧化钾溶液，称取24.4g加入含有70ml水的容量瓶中，放置冷却。把配好的碘化钾和碘化汞溶液缓缓加入容量瓶，加入的同时要渐渐摇动，加水稀释至刻度，然后摇匀。将溶液盛放在棕色玻璃瓶中置暗处保存两天后再使用。

⑥10%三氯乙酸

⑦10%酒石酸钾钠

4.试验仪器

高温消解器、紫外分光光度计、离心机、恒温水浴锅、pH计、研钵、高压灭菌锅、50mL具塞(磨口)刻度管。

四、试验过程

1.系统设置

取30个1L容量的大烧杯，洗净。将生长态势比较全都的5种植物从清水中取出，植物根部用15%的双氧水灭菌处理10分钟后，用蒸馏水清洗洁净，根据每组湿地植物湿重相等的原则，放入大烧杯。将烧杯分成5组，分别栽种香蒲、绿萝、青岛藨草、酸模、毛茛，每一组由两小组组成，栽种香蒲的两小组编号为X和X0，栽种绿萝的两小组编号为L和L0，栽种青岛藨草的两小组编号为Q和Q0，栽种酸模的两小组编号为S和S0，栽种毛茛的两小组编号为M和M0，每组中前者中加入250ml自配污水，后者作为对比加入等量的自来水。

2.测定方法

2.1磷酸酶测定方法

2.1.1根中酸性磷酸酶：

酶液提取：称取植物根系材料0.1g，放入研钵，再向其中加入1ml磷酸缓冲液(PH7.8)，当心研磨至匀浆，再将其全部吸入离心管中，在0℃下1200r/min转速的条件下，离心30min，上清液为待测液，取0.5ml。

详细方法：取配置好的pH为5.8的0.2mol·L-1醋酸钠缓冲液70ml，以之为溶剂配成浓度为0.15g·L-1对硝基苯磷酸二钠(pNPP)酶反应液，加入0.5ml酶液后将其用黑纸包裹，置于25℃下培育1小时。向其中加入1ml3NNaOH溶液，以终止酶促反应，使用α-1860S紫外可见分光光度计在405nm波特长进行比色测定。在单位时间内单位重量鲜根水解pNPP生成的pNP量来表示酶活性(μg·h-1·g-1鲜根)。

2.1.2根中碱性磷酸酶：测定方法与酸性磷酸酶的类似，唯一的区分是酶反应液是由Tris-HCl缓冲液(pH=8.7)配制的。

2.1.3水中酸性磷酸酶：取0.5ml污水作为水中酸性磷酸酶的酶液。详细方法同根中酸性磷酸酶。

2.1.4水中碱性磷酸酶：取0.5ml污水作为水中碱性磷酸酶的酶液。详细方法同根中碱性磷酸酶。

2.2脲酶测定方法

2.2.1根中脲酶活性：奈氏试剂显色法。

酶液提取：称取植物根系材料0.1g，放入研钵，再向其中加入1ml磷酸缓冲液(PH7)，当心研磨至匀浆，再将其全部吸入离