食品中各类微生物检验课件.ppt

食品中各类微生物检验;第一节食品中菌落总数的测定

第二节食品中大肠菌群的测定

第三节食品中金黄色葡萄球菌的检验

第四节食品中沙门氏菌的检验

第五节食品中志贺氏菌的检验

;第六节食品中溶血性链球菌的检验

第七节食品中病原性大肠艾希氏菌的检验

第八节食品中变形杆菌的检验

第九节食品中空肠弯曲菌的检验

第十节食品中致病性弧菌检验

;第十一节食品中耶尔森氏菌的检验

第十三节食品中肉毒梭菌的检验

第十四节食品中蜡样芽胞杆菌的检验

第十五节食品中产气荚膜梭菌的检验

第十六节食品中霉菌和酵母菌的检验;第一节食品中菌落总数的测定;;0℃时菌落数为105cfu/cm2的牛肉，可存放7d；菌落数为102cfu/cm2时，可存放18d。

0℃时菌落数为105cfu/cm2的鱼可存放6d，菌落数为103cfu/cm2时，可存放12d。

;菌落(colony)：生长在固体培养基上，来源于一个细胞，肉眼可见的细胞群体。;按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数.所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此,菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。;检验方法;另取1mL灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1mL灭菌吸管。

倾注培养

根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。

将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15mL，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。;计数和报告

选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。

我国饮用水卫生标准：

≤100个细菌总数/1mL饮水;第二节食品中大肠菌???的测定;大肠杆菌;在环境和食品卫生学上，

常被用作粪便污染的检测指标；

作为肠道病原菌污染食品的指示菌。

当然食品中检验出大肠菌群，只能说明有

肠道病原菌存在的可能，两者并非一定平行

存在。但只要食品中检出大肠菌群，则说明

有粪便污染。该食品仍可被认为是不卫生的。;在分子生物学和基因工程实验中;正常菌群，一般不致病;

日本再度发生O157病菌感染事件

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新华网东京４月６日专电日本最近再度发生病原性大肠杆菌Ｏ１５７集体感染事件，到５日为止，东京、千叶、埼玉、神奈川、茨木、群马等地已有１２５人受到感染。

这次集体感染于３月１２日首先在千叶县柏市被发现。诊断和调查结果表明，患者是由于食用了一些工厂生产的不洁净的食品而被感染的。

日本曾于５、６年前首次发生病原性大肠杆菌Ｏ１５７集体感染事件。患者有发烧、恶心、呕吐等症状。;2001年，江苏、安徽等地，肠出血性大肠杆菌O157:H7，造成177人死亡，中毒人数超过2万人。;大肠菌群MPN的常规检验方法是将不同倍数的检样稀释液接种到乳糖胆盐发酵管内，经一定的温度、时间发酵，若均不产气者则可报告为阴性；如有产气者，则需进行分离培养，证实试验，然后查取MPN检索表，报告出每100mL(g)大肠菌群的最近似数。大肠菌群MPN的检验程序如下：;;检样稀释：;(3)另取1mL灭菌吸管，按上项操作依次作10倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1支1mL灭菌吸管：

(4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。;检验方法

(一)乳糖发酵试验;将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1mL及1mL以下者，用单料乳糖胆盐发酵管，每一稀释度接种3管，置36+1℃温箱内，培养24+2小时，如所有乳糖胆盐发酵管均不产气，则可报告为大肠菌群阴性。如有产气者，按下列程序进行。;(二)分离培养;证实试验;报告;大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷基硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等。抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌，特别是革兰氏阳性菌的生长。国家标准中乳糖胆盐发酵管利用胆盐作为抑菌剂，行业标准中LST肉汤利用十二烷基硫酸钠作为抑菌剂，BGLB肉汤利用煌绿和胆盐作为抑菌剂。

抑菌剂虽可抑