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PCR原理和反应体系
1.PCR的概念
PCRpolymerasechainreaction
•就是利用DNA聚合酶在试管中
合成DNA的技术•单链DNA模板
•能提供游离3-OH的引物
•底物4dNTP
•合适的条件：温度、离子环境
g-c-t-a-c-gPol.
3-t-t-a-c-g-t-a-c-a-tHO--5
5--3
2.PCR的基本原理
•利用DNA复制的基本特性
在
•用理化方法替代体内一些酶促反应试
管
—打开双链热变性中
—单链模板的维持
合
—寡核苷酸引物化学合成成
•利用DNA聚合酶，尤其耐热TaqDNA聚合酶D
N
•模板DNA提供序列信息A
1）温度DNA结构PCR流程
2）PCR的第1-3循环95℃
模板DNA
95℃
引物1
DNA引物
引物250℃
Taq酶
引物1
DNA引物72℃
引物2
Taq酶
72℃
第1轮结束
第2轮开始
95℃
Taq酶
Taq酶
50℃
72℃
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