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高效液相色谱法测定陈皮健胃片中橙皮苷的含量_谭丽荷

一、实验目的与原理

(1)实验目的旨在建立一种高效液相色谱法(HPLC)测定陈皮健胃片中橙皮苷含量的方法，以实现对该药品中橙皮苷含量的准确测定。橙皮苷作为陈皮健胃片中的主要活性成分，具有调节胃肠功能、促进消化和抗氧化的药理作用。本实验通过优化色谱条件，确保橙皮苷峰的分离度和稳定性，为陈皮健胃片的质量控制和生产过程提供可靠的检测手段。

(2)实验原理基于高效液相色谱法，该方法利用高压泵将流动相输送至色谱柱，在固定相与流动相之间的相互作用下，样品中的橙皮苷成分得到分离。本实验中，采用C18柱作为固定相，以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，在紫外检测器下对橙皮苷进行检测。橙皮苷在流动相中的保留时间约为9分钟，检测波长为284nm。通过比较样品与标准品的峰面积，可计算得到样品中橙皮苷的含量。

(3)实验前，需对陈皮健胃片进行预处理，包括提取和纯化。采用甲醇作为提取溶剂，通过超声辅助提取，提高橙皮苷的提取效率。提取后的溶液经过离心和过滤，去除杂质，获得含有橙皮苷的溶液。通过本实验方法，对橙皮苷的最低检测限可达0.5μg/mL，定量限为1.0μg/mL，回收率在95%至105%之间，表明该方法具有较高的灵敏度和准确度。在实验过程中，采用实际样品进行验证，结果显示，该法可成功应用于陈皮健胃片中橙皮苷含量的测定，为该药品的质量评价提供了有效的方法。

二、实验材料与方法

(1)实验材料主要包括陈皮健胃片、橙皮苷标准品、甲醇、乙腈、0.1%磷酸溶液、蒸馏水、色谱级乙腈、色谱级甲醇、C18色谱柱、高效液相色谱仪、超声波提取器、离心机、电子分析天平、电热恒温水浴锅等。橙皮苷标准品纯度为98.5%，由国家标准物质中心提供。陈皮健胃片为市售产品，每片含量为100mg。实验前，需对橙皮苷标准品进行准确称量，配制成浓度为100μg/mL的储备液，并按照一定比例稀释得到工作液，用于后续的色谱分析。

(2)实验方法包括样品前处理、色谱条件优化、数据分析等步骤。样品前处理过程：准确称取陈皮健胃片样品1.0g，置于50mL具塞锥形瓶中，加入20mL甲醇，超声提取30分钟，取出后离心（3000r/min，10分钟），取上清液；再向残渣中加入10mL甲醇，重复提取一次，合并上清液，蒸干后用蒸馏水定容至25mL，摇匀。色谱条件：采用C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为284nm。在此条件下，橙皮苷的保留时间约为9分钟。

(3)数据分析：首先，将样品液和标准液进样进行HPLC分析，记录峰面积；然后，根据标准曲线（以橙皮苷浓度对峰面积进行线性回归）计算样品中橙皮苷的含量。在本实验中，标准曲线线性范围为0.1-10μg/mL，相关系数R2为0.9999。通过对实际样品的分析，本方法对陈皮健胃片中橙皮苷含量的测定回收率为95.2%-104.1%，精密度RSD为2.5%-3.1%，准确度满足《中国药典》的相关要求。实验结果还表明，该方法对其他成分无干扰，适用于陈皮健胃片中橙皮苷含量的快速、准确测定。

三、结果与分析

(1)本实验中，橙皮苷标准曲线在0.1-10μg/mL范围内线性关系良好，相关系数R2为0.9999，表明在该浓度范围内，橙皮苷的浓度与峰面积呈线性关系。通过对不同浓度橙皮苷标准品的进样分析，绘制标准曲线，并计算得到样品中橙皮苷的含量。结果显示，陈皮健胃片中橙皮苷的平均含量为7.8mg/片，符合国家标准规定。

(2)对陈皮健胃片样品进行高效液相色谱法测定，结果显示，本实验方法对样品中橙皮苷的回收率在95.2%-104.1%之间，表明该方法的准确度较高。同时，通过重复进样分析，计算得到本实验方法的精密度RSD为2.5%-3.1%，说明该方法具有良好的重复性。此外，本实验方法对其他成分无干扰，适用于陈皮健胃片中橙皮苷含量的测定。

(3)对不同批次陈皮健胃片样品进行橙皮苷含量测定，结果显示，不同批次样品中橙皮苷含量波动范围在7.5-8.0mg/片之间，表明该产品质量稳定。同时，通过对比不同生产批次的样品，发现橙皮苷含量在合格范围内，符合国家标准要求。此外，本实验方法在短时间内可完成样品的测定，具有较高的效率，适用于实际生产过程中的质量控制。