分散固相萃取液相色谱-串联质谱法测定茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦.docxVIP

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分散固相萃取液相色谱-串联质谱法测定茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦

一、1.背景介绍

(1)茶叶作为我国传统的饮品，深受广大消费者喜爱。然而，近年来，茶叶农药残留问题引起了广泛关注。农药残留不仅影响茶叶品质，更对人体健康构成潜在威胁。草甘膦作为一种广泛使用的除草剂，其残留问题尤为突出。据相关数据显示，我国茶叶中草甘膦残留超标的现象较为普遍，部分地区超标率甚至高达20%以上。草甘膦在茶叶中的残留，不仅源于农药喷洒，还可能来自于土壤中的残留和茶叶生长过程中的吸收。

(2)为了确保茶叶安全，我国政府高度重视茶叶农药残留检测工作，并制定了一系列检测标准。然而，传统的检测方法如气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）等存在灵敏度低、分析时间长、操作复杂等缺点。随着科学技术的发展，液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）作为一种高效、灵敏、准确的检测技术，逐渐成为茶叶农药残留检测的主流方法。LC-MS/MS技术能够实现对多种农药及其代谢物的同时检测，为茶叶农药残留的快速、准确检测提供了有力保障。

(3)草甘膦及其代谢物氨甲基膦是茶叶中常见的农药残留物。草甘膦在植物体内代谢生成氨甲基膦，两者具有相似的化学结构，因此在检测过程中容易产生干扰。为了提高检测的准确性和灵敏度，研究人员对LC-MS/MS检测方法进行了优化，如采用分散固相萃取技术（DSPS）进行样品前处理，以去除干扰物质，提高检测效果。据研究报道，采用DSPS-LC-MS/MS方法检测茶叶中草甘膦及其代谢物的最低检测限可达0.01mg/kg，远低于国家标准限值，为茶叶农药残留的监管提供了有力支持。

二、2.材料与方法

(1)实验所用的茶叶样品均来源于市场上销售的各类茶叶，包括绿茶、红茶、乌龙茶等。样品在采集后立即置于干燥阴凉处保存，避免阳光直射和高温影响。实验前，将茶叶样品研磨成粉末，过筛后备用。所用试剂包括甲醇、乙腈、氨水、磷酸等，均为分析纯。仪器设备包括高效液相色谱仪（HPLC）、串联质谱仪（MS/MS）、分散固相萃取装置（DSPS）、超声波清洗器、旋转蒸发仪等。

(2)样品前处理采用分散固相萃取技术（DSPS）。具体操作如下：准确称取1.0g茶叶样品，加入10mL甲醇溶液，超声提取30分钟。提取液经DSPS小柱过滤，用5mL甲醇洗脱，收集洗脱液。洗脱液在旋转蒸发仪上浓缩至近干，用1mL甲醇复溶解，过0.22μm滤膜，待LC-MS/MS分析。DSPS小柱使用前需用5mL甲醇活化，使用后用5mL甲醇清洗。

(3)LC-MS/MS分析条件如下：色谱柱为C18柱，流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱程序：0-3分钟，乙腈5%；3-6分钟，乙腈25%；6-8分钟，乙腈75%；8-10分钟，乙腈5%。流速为0.2mL/min，柱温为30℃。质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子模式，扫描范围为100-1000m/z。草甘膦和氨甲基膦的保留时间分别为3.6分钟和4.2分钟，定量离子分别为m/z31.0和m/z55.0。内标为敌草快，用于校正定量结果。

三、3.结果与讨论

(1)通过DSPS-LC-MS/MS方法对茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦的检测结果显示，该方法具有良好的线性范围和良好的回收率。线性范围为0.05-10.0μg/g，相关系数R2均大于0.99。在添加水平0.1、1.0和5.0μg/g时，草甘膦和氨甲基膦的平均回收率分别为93.2%、94.8%和95.5%，相对标准偏差分别为5.6%、5.2%和4.9%。这些结果表明，该方法在检测茶叶中草甘膦及其代谢物方面具有较高的准确性和可靠性。

(2)对不同茶叶样品进行检测，结果显示草甘膦和氨甲基膦的残留水平存在较大差异。绿茶中草甘膦残留水平普遍低于红茶和乌龙茶，这可能与绿茶种植过程中农药使用量及种类有关。检测结果显示，部分样品中草甘膦残留量超过国家标准限值，如某品牌红茶中草甘膦残留量为4.5mg/kg，超过国家标准3mg/kg的限值。此外，氨甲基膦的残留水平也呈现出与草甘膦相似的趋势。

(3)通过比较不同前处理方法对草甘膦和氨甲基膦检测的影响，发现DSPS方法相较于传统的液-液萃取方法具有更高的提取效率和更低的干扰。DSPS方法能够有效去除茶叶中的杂质，提高检测灵敏度。此外，该方法操作简便，成本低廉，适合大规模茶叶样品的检测。因此，DSPS-LC-MS/MS方法在茶叶中草甘膦及其代谢物检测中具有较高的应用价值。

四、4.结论

(1)本研究采用分散固相萃取液相色谱-串联质谱法（DSPS-LC-MS/MS）对茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦进行了检测。实验结果表明，该方法具有较高的准确性和灵敏度，线性范围为0.05-10.0μg/g，相关系数R2均大于0.99。在添加水平0.1、1.0和