植物呼吸强度的测定.ppt

实验步骤41.取一套压力计，反应瓶中加入1克花芽菜(不要梗)；2.剪取两张2×3cm滤纸，其中一张折成伞状，插入反应瓶中的中央小井；3.吸取0.2mlKOH溶液小心地加到中央小井内，使滤纸湿润，此为测定瓶；4.另一套压力计作温压计用来校正误差（对照）。（除了不放花芽菜，其它操作同上）（共用）第29页,共38页，星期六，2024年，5月外围放植物材料中央小井放KOH第30页,共38页，星期六，2024年，5月实验步骤5当恒温水槽温度达到要求后，将加热开关拨至恒温位置将压力计装上呼吸计，使反应瓶及连接处均浸没在水面之下打开三通活塞使闭臂与大气相通，振荡15分钟（使反应瓶内外温、压平衡）第31页,共38页，星期六，2024年，5月第32页,共38页，星期六，2024年，5月实验步骤6平衡15min后，将压力计闭臂（右）液柱调到150mm处（零点），读取开臂（左）读数为初值；关闭三通活塞并计时，振荡15分钟；再将闭臂液柱高度调至零点，记下开臂读数为终值。然后打开三通活塞，重复以上操作(1-3)进行第二次测定，求其平均值。同时记录温压计的读数第二次重复如果未离开水面，则不需重新平衡第33页,共38页，星期六，2024年，5月1.打开三通活塞，温压平衡15min2.闭臂调零，开臂读值(活塞打开)3.关闭活塞，反应15min4.闭臂调零，开臂读值(活塞关闭)重复步骤2—4一次第34页,共38页，星期六，2024年，5月实验步骤7实验完毕，打开三通活塞；将压力计移到压力计架上，取下反应瓶，从中取出花芽菜将花芽菜与另一张2×3cm滤纸放入量筒(10ml)，用排水法测取反应瓶的固相体积第35页,共38页，星期六，2024年，5月呼吸速率计算（O2μl/克材料/小时）=式中：h1：校正后高度（压力）差=（测定瓶终值-初值）-（温压瓶终值-初值）K：反应瓶常数（μlO2/mm）=第36页,共38页，星期六，2024年，5月终值终值初值初值测试对照第37页,共38页，星期六，2024年，5月K：反应瓶常数（μlO2/mm）=Vg：反应瓶气相体积(μl)=反应瓶体积-固相体积-液相体积(200μl)T：水槽绝对温度Vf：液相体积=200μl(0.2mlKOH)P0：标准大气压=10000mm(Brodie液柱高)α：待测气体（本实验为O2）的溶解度（压力=P0，温度=T时），250C时，α=0.02831第38页,共38页，星期六，2024年，5月实验目的在研究植物呼吸代谢过程中，常需要测定植物呼吸强度的变化目前常用的较为精确的瓦氏呼吸计法（微量测压法）除了可用以研究植物呼吸作用，还可以测定其它有关氧气、二氧化碳气体交换反应第2页,共38页，星期六，2024年，5月瓦勃（O.H.Warburg，1883～1970）生物化学家，荣获1931年度诺贝尔生理学或医学奖上世纪20年代初他设计出一种通过氧消耗量来测定细胞呼吸速率的瓦氏测压计用这种仪器和一种简便易行的组织薄片法结合，可以精确测定活细胞呼吸过程中生化反应的起点和终点瓦氏呼吸计后来在细胞呼吸研究工作中得到广泛应用第3页,共38页，星期六，2024年，5月判断呼吸作用强度和性质的两个指标呼吸速率（呼吸强度）：单位时间、单位鲜重或干重植物组织释放的CO2或吸收O2的量呼吸商（呼吸系数）：植物组织在一定时间内，释放CO2与吸收O2的量的比值。？第4页,共38页，星期六，2024年，5月在一定密闭的、定温定体积的系统中进行样品气体变化的测定瓦氏呼吸计原理气体被吸收气体分子减少压力降低气体产生气体分子增加压力升高第5页,共38页，星期六，2024年，5月气体体积变化压力变化计算气体变化量测压计压力的变化，可以在测压计上表现出来由此，可计算产生气体或者吸收气体的数量密闭温度/体积不变第6页,共38页，星期六，2024年，5月实验原理2◆在呼吸过程中，释放CO2和吸收O2是同时进行的，在压力计上观察到的压力变化是O2的吸收量和CO2释放量的总结果。◆当在压力计反应瓶的中央小井中加入碱液（KOH），则呼吸放出的CO2被碱液吸收，因此可由压力计(测压计)内的压力变化测出O2的吸收量。第7页,共38页，星期六，2024年，5月设置对照◆反应瓶中压力的变化还受到环境大气压和水浴温度波动的影响◆所以在实验时必须有另一支压力计作温压计(空白对照)，以校正实验时环境条件变化引起的误差第8页,共38页，星期六，2024年，5月实验材料花芽菜第