鱼源贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定及其联合葡萄糖酸钠对鲤益生效果的研究.pdf

摘要

大食物观背景下，“无抗”养殖大力发展，益生菌做为抗生素替代品在水产养殖领

域取得了瞩目的成就，广泛用于治疗和预防水产动物各种疾病。如何进一步提高益生菌

在绿色水产养殖应用中的使用效果是目前产业中迫切需要解决的重要科学问题。宿主来

源的益生菌因具有适应宿主环境的优势，较非宿主源益生菌可以发挥更好的益生效果。

此外，益生菌必须经过多个生物屏障才能到达效应位点，满足一定数量的活菌是其发挥

益生作用的关键因素。因此，本研究旨在从黄河鲤肠道中分离获得一株具有抗菌活性的

潜在益生菌，并探究益生元葡萄糖酸钠对该菌株的促生长影响。通过养殖试验，检验二

者在饲料中联合添加饲喂对鲤生长性能、肠道健康、抗感染能力的效果是否优于单独添

加时的效果。主要研究内容及结果如下：

（1）鱼源益生菌的分离：

21R-71003

本研究从黄河鲤肠道中共分离出株细菌，其中菌株产酶活性较高，同

时产蛋白酶、甘露聚糖酶、淀粉酶和纤维素酶，是一株潜在的益生菌。菌株R-7100316S

rRNABacillusvelezensis99.85%

序列与贝莱斯芽孢杆菌（）具有的同源性；基因组序列

总长为4,221,564bp，GC含量为46.12%，含有4403个编码序列（CDS），内含1个质

ANIdDDHR-71003

粒；分析和分析结果显示，菌株与贝莱斯芽孢杆菌相似度最高，分

别为97.31%和84.50%。综上，菌株R-71003是一株新的贝莱斯芽孢杆菌。抑菌试验表

R-71003AeromonasveroniiA.hydrophila

明菌株可抑制维氏气单胞菌（）、嗜水气单胞菌（）

等鱼类常见病原菌生长；药敏试验显示菌株R-71003对氨苄西林、庆大霉素、青霉素等

常见抗生素敏感；安全性试验显示菌株R-71003无溶血性，不造成鲤致病致死，是一株

R-71003pH20.3%

安全的菌株。非生物胁迫试验表明菌株在低（）、高胆汁盐浓度（）

和高温（80和90℃）表现出较高的存活率，具有耐受性。此外，该菌在24h自聚集能

力为83.5%，与乙酸乙酯和氯仿的疏水性远高于二甲苯，具有较好的自聚集能力和细胞

表面疏水性。综上，B.velezensisR-71003表现出良好的益生潜力。

（2）葡萄糖酸钠对B.velezensisR-71003的促生长作用：

为促进B.velezensisR-71003的应用效果，提高该菌株在肠道中的数量，本研究以

I

不同浓度的葡萄糖酸钠添加对B.velezensisR-71003进行纯培养，探讨葡萄糖酸钠在体

外和体内对B.velezensisR-71003生长的影响。结果表明，葡萄糖酸钠浓度在0.3-0.9%

B.velezensisR-71003P0.05dnaA

时能促进的生长（），显著提高菌株生长相关基因和

yabD的表达水平（P0.05），而浓度在1.5-2.4%时抑制该菌株的生长。同时，葡萄糖酸

钠浓度为0.6%时，显著提高B.velezensisR-71003在低pH（2）和高温（90℃）环境下

P0.05