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高效液相色谱测定食品中的黄曲霉毒素

一、引言

(1)黄曲霉毒素（Aflatoxins，简称AFs）是一类由某些曲霉菌和青霉菌产生的次级代谢产物，主要污染粮食、油料和坚果等食品。这些毒素具有强烈的致癌、致畸和致突变作用，对人体健康构成严重威胁。据统计，全球每年约有数百万人因摄入黄曲霉毒素而患癌症，其中肝癌是主要受害者。为了保障食品安全，防止黄曲霉毒素对公众健康的危害，世界各国对食品中黄曲霉毒素的检测和控制都给予了高度重视。

(2)高效液相色谱法（High-PerformanceLiquidChromatography，HPLC）作为一种高效、灵敏、准确的分析技术，已成为检测食品中黄曲霉毒素的主要手段。该方法具有样品前处理简单、检测速度快、分离效果良好等优点。近年来，随着色谱柱、检测器和数据处理技术的发展，HPLC技术在食品中黄曲霉毒素的检测领域得到了广泛应用。根据世界卫生组织（WHO）和国际食品法典委员会（CodexAlimentariusCommission，CAC）的规定，食品中黄曲霉毒素的最大允许残留量（MaximumResidueLimit，MRL）在不同国家和地区有所不同，但普遍要求严格。

(3)在我国，黄曲霉毒素的检测主要依据GB2761-2016《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》等国家标准。这些标准规定了食品中黄曲霉毒素B1（AFB1）、B2（AFB2）、G1（AFG1）和G2（AFG2）的最大限量，并对检测方法、样品采集和实验室质量控制等方面提出了具体要求。例如，GB5009.24-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B1的测定》就详细描述了采用高效液相色谱法检测食品中AFB1的方法。在实际应用中，许多食品安全检测机构和实验室都采用了HPLC技术，以确保食品中黄曲霉毒素的含量符合国家标准，保障人民群众的饮食安全。

二、黄曲霉毒素概述

(1)黄曲霉毒素是一类广泛存在于谷物、坚果、豆类等食品中的真菌毒素，主要由黄曲霉（Aspergillusflavus）和寄生曲霉（A.parasiticus）产生。这些毒素具有极强的毒性和致癌性，被世界卫生组织（WHO）列为1类致癌物。据统计，全球每年约有数十万人因摄入黄曲霉毒素而患癌症，其中肝癌是最常见的病症。黄曲霉毒素的污染已经成为全球食品安全的一个重要问题。

(2)黄曲霉毒素主要包括B1、B2、G1和G2四种类型，其中AFB1的毒性和致癌性最强。AFB1主要污染花生、玉米、大豆等油料作物，而AFB2则主要污染花生、花生油和玉米。黄曲霉毒素的污染不仅限于发展中国家，发达国家也存在一定程度的污染。例如，美国食品药品监督管理局（FDA）在2019年发布的报告中指出，美国市场上的一些花生制品中检测到了AFB1。

(3)黄曲霉毒素的检测方法主要包括薄层色谱法、酶联免疫吸附法（ELISA）和高效液相色谱法（HPLC）等。其中，HPLC法因其灵敏度高、准确性强等优点，已成为食品中黄曲霉毒素检测的黄金标准。例如，我国GB5009.24-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B1的测定》就规定采用HPLC法检测食品中AFB1。近年来，随着检测技术的不断发展，新型检测方法如液相色谱-质谱联用法（LC-MS）等也在黄曲霉毒素检测中得到应用。

三、高效液相色谱技术原理

(1)高效液相色谱法（HPLC）是一种基于高压液相流动相和固定相相互作用的分析技术，用于分离、鉴定和定量复杂混合物中的成分。HPLC技术自20世纪60年代以来，已成为化学、生物、医药和食品等领域的重要分析工具。其原理基于不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，通过调整流动相的组成和流速，实现对混合物中各成分的分离。

(2)在HPLC系统中，流动相通常为有机溶剂，如乙腈、甲醇等，而固定相则是一根填充有特定固定相材料的色谱柱。固定相材料可以是硅胶、离子交换树脂或聚合物等，根据分析物的性质选择合适的固定相。当样品溶液通过色谱柱时，不同成分在固定相和流动相之间的分配系数不同，导致其在色谱柱中的保留时间各异，从而实现分离。例如，食品中黄曲霉毒素的检测常使用C18反相色谱柱，因其对极性物质的分离效果良好。

(3)HPLC检测器主要有紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器（FLD）、电感耦合等离子体质谱检测器（ICP-MS）等。其中，UV-Vis检测器因其操作简单、成本较低而被广泛应用。在黄曲霉毒素检测中，UV-Vis检测器可以检测AFB1、AFB2等物质的特定波长下的吸收值，从而实现定量分析。例如，GB5009.24-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B1的测定》中就采用了UV-Vis检测器进行AFB1的定量。随着技术的发展，新型检测器如LC-MS联用技术也在黄曲霉毒素检测中展现出更高